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胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶，可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端肽鍵。傳統(tǒng)的胰蛋白酶由豬、牛和羊等動物的胰臟提取獲得，曾被廣泛應用于生物制品的生產(chǎn)。動物來源的胰蛋白酶有引入外源性病毒的風險，例如在上世紀60年代，曾發(fā)生脊髓灰質(zhì)炎疫苗、減毒黃熱活疫苗檢出SV40病毒和禽白血病病毒的事件，2010年，某廠家的輪狀病毒疫苗檢出了豬圓環(huán)病毒序列。中國藥典2020版三部指出：“生物制品的原材料及輔料……應盡可能選擇無病毒安全性風險或低風險的原材料和輔料用于生物制品生產(chǎn)，如選擇采用重組技術生產(chǎn)的生物材料替代動物源
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一，什么是重組胰蛋白酶？重組胰蛋白酶是指利用基因重組技術生產(chǎn)的胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)，它是絲氨酸蛋白水解酶家族成員之一，屬肽鏈內(nèi)切酶，國際酶學編號為：EC3.4.4.4。二，胰蛋白酶的來源及水解特異性最初發(fā)現(xiàn)并使用的胰蛋白酶是從牛、羊、豬的胰臟提取的，其廣泛存在于在脊椎動物和微生物中，不同來源其最適溫度有所不同，其中哺乳動物源胰蛋白酶與人體最為相近。胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原合成場所，合成后作為胰液的成分而分泌，經(jīng)腸激酶或胰蛋白酶切去前導肽而形成具有活性的胰蛋白酶，為肽
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背景目前，自身免疫性疾病主要由廣泛的免疫抑制劑和阻斷抗體治療，這些藥物可以控制疾病，但通常不能治愈。CAR-T療法是針對某些類型血癌的成熟治療方法，靶向CD19的嵌合抗原受體（CAR）T細胞在B細胞惡性腫瘤中非常有效。同時，CD19CART細胞也靶向觸發(fā)自身免疫性疾?。ˋID）的自身反應性B細胞，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、特發(fā)性炎癥性肌炎（IIM）和系統(tǒng)性硬化癥（SSc）。CAR-T細胞療法的下一個應用會用于治療自身免疫性疾病嗎？或許在近期德國的一項相關性研究中能找到答案。如圖，B細胞在自身
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一，EGF簡介EGF的發(fā)現(xiàn)是由蒙塔爾奇尼（Montalcini）和科恩（Cohen）教授在純化小鼠頜下腺神經(jīng)生長因子(NGF)時發(fā)現(xiàn)一種可促進新生小鼠提早開眼、長牙及對熱穩(wěn)定的多肽類物質(zhì)，此多肽物具有抑制胃酸分泌作用，稱為“抑胃素”，后發(fā)現(xiàn)“抑胃素”可直接促進表皮生長，因此命名為表皮生長因子（EGF）。兩位生物學家，也因此獲得1986年的諾貝爾醫(yī)學獎。1974年在人尿液中提純獲得人源表皮生長因子(hEGF)，其基因定位于4q25，由53個氨基酸構成，分子量約6KDa，含有3個二硫鍵形成了3個分子
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在實驗中大家經(jīng)常遇到這些問題：1.通過各種在線軟件進行預測獲得miRNA靶向基因，但miRNA對靶基因的實際作用不清楚;2.又或者預測到轉(zhuǎn)錄因子對基因的表達起抑制或增強的作用，而具體活性以及結(jié)合位點仍然需驗證;3.lncRNA或者circRNA吸附miRNA效果如何還未知。這個時候就需要用到熒光素酶(Luciferase)實驗。熒光素(Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱，其中最有代表性的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶，分別命名為
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單細胞功能蛋白組學助力凱特和Carl June團隊的Car-T研究
細胞治療臨床研究方案IsoPlexis單細胞功能蛋白質(zhì)組技術將單細胞技術和功能性蛋白質(zhì)組學結(jié)合起來采用微流控微室反應和抗體條碼技術在單細胞水平對分泌的多種細胞因子和胞內(nèi)磷酸化蛋白組等在活細胞狀態(tài)下進行高靈敏多重檢測分析，對功能蛋白進行定性、定量，以此洞察單細胞功能異質(zhì)性。通過簡單易用的生信分析軟件對單細胞數(shù)據(jù)進行自動分析，得到具有指導性的結(jié)果，幫助下一步?jīng)Q策。CD19CAR-T治療NHL臨床療效相關生物標志物發(fā)表文章：Preinfusionpolyfunctionalanti-CD19chime -
使用Revvity VICTOR Nivo進行細胞水平的HTRF檢測
在藥物研發(fā)過程中常用細胞學分析，來揭示化合物在體外誘導的效應。本文中，我們將介紹使用VICTORNivo進行細胞水平的HTRF檢測，分析α-微管蛋白乙酰化-K40水平。在人類神經(jīng)系統(tǒng)疾病中，常發(fā)生微管蛋白乙?；?，因而被廣泛研究。αβ-微管蛋白異二聚體形成微管，微管是細胞骨架中的基本聚合物。通過翻譯后修飾（PTMs），細胞調(diào)節(jié)微管結(jié)構和功能。α-微管蛋白在K40上的乙?；谄渌鸓TMs中起關鍵作用。已知抑制HDAC6（組蛋白去乙?；?）后，會使微管蛋白乙?；险{(diào)，我們采用了小鼠成纖維細胞（NIH -
去除核酸污染逐典生物耐高鹽全能核酸酶在150-900mM鹽濃度內(nèi)均保持高酶活
一，宿主DNA殘留控制的法規(guī)要求隨著生物醫(yī)藥行業(yè)的快速發(fā)展，越來越多的生物制品開始服務于人類健康，治療性抗體藥物、細胞治療、病毒載體疫苗等需求日益龐大。不同于傳統(tǒng)口服類藥物，大量生物制品通過注射等給藥方式直接進入體內(nèi)，因此更需要嚴格的質(zhì)量監(jiān)管來保證生物制品的安全性和有效性。宿主核酸的殘留因其可能帶來的傳染性或者致瘤的風,險而被作為生物制品安全監(jiān)管中的重要一項。WHO及世界各國對宿主核酸的殘留都有嚴格的規(guī)定如疫苗及治療類生物制品的DNA殘留量通?？刂圃?00pg/劑量以下，部分產(chǎn)品甚至要求DNA殘
