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掌握D-螢光素鉀鹽使用方法,輕松提升實(shí)驗(yàn)效果!
一.體外生物發(fā)光檢測(cè)1)用無(wú)菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲(chǔ)存液(100-200×),混勻。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲(chǔ)存液稀釋至0.15-0.3mg/mL的工作液濃度。3)去除細(xì)胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進(jìn)行圖像分析。二.體內(nèi)活體成像分析1)用無(wú)菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲(chǔ)存液,混勻。2)用0.2µm濾膜過(guò)濾除菌。立即使用,或 -
Lonza FlashGel 核酸電泳的利器,5分鐘可分離32個(gè)樣品
聽(tīng)說(shuō)你做核酸電泳和DNA片段回收如此繁瑣?配電泳液→配瓊脂糖→加EB染料→等膠凝固→加樣→等跑膠→凝膠成像儀照膠→紫外燈下切膠→DNA片段回收試劑盒一頓操作猛如虎,一看濃度零點(diǎn)五,費(fèi)時(shí)費(fèi)力又傷身,還要重頭再來(lái)過(guò)。你身心疲憊的說(shuō)沒(méi)有其他好辦法。什么?!比“閃電俠”還快的FlashGel閃膠系統(tǒng)你竟然不知道!閃速解決你的煩惱,讓你不再emo!FlashGel閃膠系統(tǒng)是一個(gè)快速分離DNA,不需要紫外光照射就可在跑膠的同時(shí)觀察DNA/RNA遷移的便捷電泳系統(tǒng)。這個(gè)革命性的工具在5分鐘之內(nèi)分離多達(dá)32個(gè)樣 -
螢光素酶報(bào)告基因技術(shù)報(bào)告基因:基因表達(dá)變化或者與基因表達(dá)變化相關(guān)的細(xì)胞事件的一個(gè)指示劑。通常是一種編碼易被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因,其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定。引入報(bào)告基因,通過(guò)很容易被檢測(cè)的報(bào)告基因的表達(dá)來(lái)判斷啟動(dòng)子區(qū)域功能螢光素酶作為報(bào)告基因的優(yōu)點(diǎn):?沒(méi)有內(nèi)源性表達(dá)?易于定量?高靈敏度、線性范圍寬?反應(yīng)迅速?可實(shí)現(xiàn)雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)螢光素酶報(bào)告基因的應(yīng)用1.免疫學(xué)檢測(cè)2.細(xì)胞信號(hào)通路分析3.轉(zhuǎn)錄因子分析4.蛋白-蛋白相互作用5.轉(zhuǎn)錄后修飾6.調(diào)控元件功能研究(啟動(dòng)子,增強(qiáng)子等)7.病毒研究8
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逐典新款細(xì)胞活力檢測(cè)試劑LuminescentCellViabilityDetectionKit(以下簡(jiǎn)稱“LCV”)通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ATP含量來(lái)分析細(xì)胞活性,該試劑盒發(fā)光信號(hào)穩(wěn)定,樣品可進(jìn)行批量處理和高通量篩選,是進(jìn)行自動(dòng)化高通量篩選(HTS),細(xì)胞增殖和毒性分析的理想選擇。LCV使用方便,將單一試劑直接加入含有細(xì)胞的培養(yǎng)液中,即可進(jìn)行檢測(cè)!一經(jīng)上線,便深受各位藥企同仁的青睞!檢測(cè)原理CellTiter-Glo®是基于ATP的裂解型檢測(cè)方法。螢光素在ATP的參與下,被螢光素酶氧化,產(chǎn)生光。螢光素
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干貨來(lái)襲 | 逐典生物為您提供高活性細(xì)胞因子&酶整體解決方案
細(xì)胞因子有毒副作用且半衰期短?想要獲得靶向特定受體的細(xì)胞因子,篩選工作量大且復(fù)雜?酶在現(xiàn)有反應(yīng)體系中穩(wěn)定性和活性不高?包涵體表達(dá),多次變復(fù)性處理后,細(xì)胞因子和酶居然沒(méi)活性?細(xì)胞因子和酶沒(méi)表達(dá)或表達(dá)量低,工藝開(kāi)發(fā)周期長(zhǎng),制備成本太高?您在進(jìn)行細(xì)胞因子和酶的開(kāi)發(fā)過(guò)程中,是否遇到如上問(wèn)題的困擾?逐典生物通通幫您搞定!一整體解決方案逐典生物科學(xué)家團(tuán)隊(duì)在細(xì)胞因子和酶領(lǐng)域深耕十多年,擁有強(qiáng)大的分子設(shè)計(jì)和工藝開(kāi)發(fā)能力,通過(guò)AI驅(qū)動(dòng)的分子設(shè)計(jì)平臺(tái)、高通量蛋白制備平臺(tái)以及專有的包涵體變復(fù)性平臺(tái)等,可以快速、低成本 -
TIL療法獲批 | 看IsoPlexis單細(xì)胞功能蛋白組如何助力TIL功能評(píng)估
今年2月16日,IovanceBiotherapeutics公司宣布FDA加速批準(zhǔn)其腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)療法AMTAGVI(lifileucel)上市,用于治療先前經(jīng)過(guò)PD-1抗體治療的不可切除或轉(zhuǎn)移性黑色素瘤成年患者。據(jù)悉,lifileucel是款獲批上市的TIL細(xì)胞療法,標(biāo)志著細(xì)胞療法在腫瘤治療領(lǐng)域的又一重要里程碑。開(kāi)發(fā)有效的TIL療法需要對(duì)TIL細(xì)胞本身的功能特性的深入理解,更取決于如何開(kāi)發(fā)能夠快速擴(kuò)增且保持TIL細(xì)胞功能的生產(chǎn)工藝。在TIL回輸?shù)交颊唧w內(nèi),治療作用的持久性如何保持, -
Q:在哪一步中加入Pannarase全能核酸酶?A:這取決于您處理的樣本。在病毒純化時(shí),一般在病毒澄清后加入;大腸桿菌蛋白純化時(shí),可以在菌體裂解時(shí)就加入;在處理細(xì)胞結(jié)團(tuán)問(wèn)題時(shí),可以直接加入培養(yǎng)基中與細(xì)胞共培養(yǎng)。Q:如果反應(yīng)溫度無(wú)法達(dá)到37℃,該如何使用?A:酶活性受到溫度、處理時(shí)間、酶活單位的影響,如果溫度無(wú)法達(dá)到37'C,可以適當(dāng)添加酶的用量,或者延長(zhǎng)孵育時(shí)間。Q:全能核酸酶是否與蛋白酶抑制劑兼容?A:可以兼容,但需要注意的是許多蛋白酶抑制劑含有EDTA。EDTA開(kāi)始高于1mM時(shí),EDTA將抑
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白介素2/21(IL-2/IL-21):促進(jìn)NK細(xì)胞擴(kuò)增和活化
SoifferRJ等自1996年起即報(bào)道IL-2低劑量持續(xù)輸注和間歇給藥對(duì)轉(zhuǎn)移癌患者的CD56+NK細(xì)胞有明顯擴(kuò)增效果。大部分NK細(xì)胞表面具有IL-2中親和性受體,IL-2誘導(dǎo)NK的殺傷活性約需18~24小時(shí)。此外,IL-2還可誘導(dǎo)NK細(xì)胞的增殖,一般在刺激后3~4天開(kāi)始發(fā)生增殖,其機(jī)理為IL-2可誘導(dǎo)NK細(xì)胞表達(dá)IL-2Rα鏈,新表達(dá)的α鏈與原先細(xì)胞表面的β鏈和γ鏈結(jié)合形成高親和性受體,在IL-2存在下刺激NK細(xì)胞發(fā)生增殖。圖片來(lái)源:SharmaR,etal.ImmunolRes.2018We