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實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞質(zhì)膜是由蛋白質(zhì)不同程度鑲嵌在脂雙層中所形成的動(dòng)態(tài)流動(dòng)結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)和脂類分子又與寡糖鏈結(jié)合為糖蛋白和糖脂分子，糖蛋白和糖脂分子伸至細(xì)胞表面的分枝狀寡糖鏈在質(zhì)膜表面形成細(xì)胞外被（又稱為糖萼）。許多研究結(jié)果表明：細(xì)胞間的分子識(shí)別、細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化、免疫反應(yīng)和腫瘤發(fā)生等均與細(xì)胞外被（分枝狀寡糖鏈）有關(guān)。凝集素（lectin）是一類含糖的（少數(shù)凝集素例外）并能與糖進(jìn)行專一性結(jié)合的蛋白質(zhì)，它具有凝集細(xì)胞和刺激細(xì)胞分裂的作用。凝集素促使細(xì)胞凝集主要是由于它能與細(xì)胞外被的糖分子相連接、在細(xì)胞間形成“
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實(shí)驗(yàn)原理染色方法：革蘭染色法是細(xì)菌學(xué)中zui廣泛使用的一種鑒別染色法。1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立。方法是先將細(xì)菌用結(jié)晶紫染色，加媒染劑（增加染料和細(xì)胞的親和力）后，用脫色劑（酒精或丙酮）脫色，再用復(fù)染劑染色。如果細(xì)菌不被脫色而保存原染液顏色者為革蘭陽(yáng)性菌(G＋)；如被脫色，而染上復(fù)染液的顏色者為革蘭陰性菌(G-)。此染色法可將所有具有細(xì)胞壁的細(xì)菌分為兩大類：革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌。單染色法：只能觀察微生物的大小、形狀、和細(xì)胞排列狀況，但不能鑒別微生物以及它的特殊構(gòu)造等。復(fù)染色法：用兩種或兩
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實(shí)驗(yàn)試劑液氮，干冰，1％明膠，4％多聚甲醛，PBS，含1％NP-40的PBS，3％BSA／PBS稀釋抗體，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗，DAB／金屬鹽試劑，3％過(guò)氧化氫，0.3％(W／V)氯化鎳貯存液，Harris蘇木精，乙醇實(shí)驗(yàn)設(shè)備載玻片，Whatman1＃濾紙，低倍光學(xué)顯微鏡實(shí)驗(yàn)材料未受損傷的組織實(shí)驗(yàn)步驟1.將未受損傷的組織切剖成小樣本，約lcmXIcmX0.4cm。2.將標(biāo)本放在卡片的一端。標(biāo)記該卡片，將帶有標(biāo)本的一端浸入液氮中。60s后，取出標(biāo)本并放在干冰上。修剪卡片，使其大小剛好比組織塊稍
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實(shí)驗(yàn)原理線粒體是細(xì)胞內(nèi)一種重要細(xì)胞器，是細(xì)胞進(jìn)行呼吸作用的場(chǎng)所。細(xì)胞的各項(xiàng)活動(dòng)所需要的能量，主要是通過(guò)線粒體呼吸作用來(lái)提供的?；铙w染色是應(yīng)用無(wú)毒或毒性較小的染色劑真實(shí)地顯示活細(xì)胞內(nèi)某些結(jié)構(gòu)而又很少影響細(xì)胞生命活動(dòng)的一種染色方法。詹納斯綠B是線垃體的專一性活體染色劑。線粒體中細(xì)胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)呈藍(lán)綠色，而在周圍的細(xì)胞質(zhì)中染料被還原，成為無(wú)色狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)試劑1.l／300詹納斯綠B染液2.Ringer氏液(哺乳類用)實(shí)驗(yàn)設(shè)備1.顯微鏡2.手術(shù)器材一套3.解剖盤4.小平皿5.載片6.蓋片7
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實(shí)驗(yàn)試劑膠原酶V，512kut/mg(Sigma公司)，DNA酶(Sigma公司)，胎牛血清(Gibco公司)，RPMI1640培養(yǎng)液(Gibco公司)，Dextran(Pharmacia公司)，Hanks平衡鹽溶液(Gibco公司)。實(shí)驗(yàn)設(shè)備離心機(jī)，注射器，顯微鏡，超凈工作臺(tái)等。實(shí)驗(yàn)材料成年雜種豬，豬齡12mo，體質(zhì)量150kg左右，豬被屠宰放血后，在相對(duì)無(wú)菌條件下迅速取出胰腺，保存于4℃Hanks液中送至實(shí)驗(yàn)室，熱缺血時(shí)間少于10min，冷缺血時(shí)間少于90min。實(shí)驗(yàn)步驟1.胰島分離胰腺取回
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實(shí)驗(yàn)步驟1.所有容器高溫滅菌兩次，DEPC高溫滅菌，所有的試劑用DEPC配制，高溫滅菌。2.在一滅菌2mL管中加入：5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0)0.1mL。3.稱取0.2g小麥黃化苗的葉片，迅速在液氮中研磨成粉末，轉(zhuǎn)入已準(zhǔn)備好的離心管中，劇烈震蕩。4.混勻，冰浴30min。5.4℃，12000rpm，10min。6.上清至另一離心管中加0.4mL氯仿，劇烈震蕩。冰浴放置5min。7.4℃，12000rpm，10min。8.棄有機(jī)相(下層)加入0.4mL
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實(shí)驗(yàn)步驟1.克隆胚胎制備和胚胎培養(yǎng)卵母細(xì)胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培養(yǎng)液中培養(yǎng)。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml細(xì)胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作為工作液，卵母細(xì)胞在此液中被去掉紡錘體-染色體復(fù)合體；用卵丘細(xì)胞作為核供體。用注射針?lè)磸?fù)吸入、吹出卵丘細(xì)胞，以除去其細(xì)胞膜和大部分細(xì)胞質(zhì)，然后用注射針將裸卵的核注入去除紡錘體-染色體復(fù)合體的卵母細(xì)胞中。孤雌胚胎所用的卵母細(xì)胞與用于制備核移植胚胎的卵母細(xì)胞來(lái)源相同。孤雌胚胎和核移植胚胎用不含Ca2、卻含10mMSr2和細(xì)胞松弛
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實(shí)驗(yàn)試劑HBSS：NaCl8g/LKCl400mg/LKH2PO460mg/L無(wú)水Na2PO447.86mg/L無(wú)水葡萄糖1000mg/LNaHCO3350mg/L實(shí)驗(yàn)材料妊娠期BALB/c小鼠實(shí)驗(yàn)步驟1.將1~2天齡新生裸鼠窒息后，置于培養(yǎng)皿中，用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠，流水*沖洗，然后用70%乙醇洗兩次。小鼠應(yīng)立即使用，若待處理的小鼠數(shù)量較多，可置冰上30min。2.去除小鼠的四肢和尾巴。3.將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡(jiǎn)單切口，用大鼠牙齒鑷輕輕將整個(gè)身體的皮膚剝下，用一把鑷子夾住身
