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實驗原理在細(xì)胞核中，DNA是環(huán)狀附著在核基質(zhì)上，細(xì)胞裂解過程中，核基質(zhì)被溶解、抽提，DNA的結(jié)構(gòu)則未發(fā)生變化。如果DNA鏈上存在缺口，則使DNA超螺旋變的松弛，DNA環(huán)向外展，同時由于暴露了陰電荷，在電場力的作用下，松動的DNA環(huán)向陽極遷移，但是由于這種松動的DNA環(huán)一端仍附著于核DNA，其遷移距離受到限制，因此尾長并不總是真實反映鏈缺口的多少。實際應(yīng)當(dāng)依靠尾長與尾部的熒光強(qiáng)度同時來進(jìn)行分析。實驗步驟1.分離制備單細(xì)胞懸液：1)體外培養(yǎng)的細(xì)胞株：用胰酶消化，吹打成單細(xì)胞懸液；2)體內(nèi)臟器細(xì)胞：處
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通過生化和遺傳學(xué)研究表明，RNA干擾包括起始階段和效應(yīng)階段(inititationａndeffectorsteps)。在起始階段，加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(smallinterferingRNAs,siRNAs)。證據(jù)表明；一個稱為Dicer的酶，是RNaseIII家族中特異識別雙鏈RNA的一員，它能以一種ATP依賴的方式逐步切割由外源導(dǎo)入或者由轉(zhuǎn)基，病毒感染等各種方式引入的雙鏈RNA，切割將RNA降解為19-21bp的雙鏈RNAs(siRNAs)，每個
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實驗試劑1.10％中性福爾馬林(pH6．8～7．1)甲醛10ml蒸餾水90ml醋酸鈉2g2.酸性磷酸酶作用液蒸餾水90ml0．2mol／L醋酸緩沖液(pH4．6)12ml5％*2ml3.2％β—甘油磷酸鈉4ml先將蒸餾水和醋酸緩沖液混合，隨后分成大致相等的兩份，一份中加*溶液，另一份加甘油磷酸鈉溶液，然后再將兩者緩緩混合，邊混邊攪勻后若酸堿度值不到pH5．0，可加少量醋酸的調(diào)整。此作用液在臨用前配制，不能貯存。配好后的作用液應(yīng)透明無絮狀懸浮物和沉淀，否則將嚴(yán)重影響實驗結(jié)果。4.1％硫化胺溶液硫化
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實驗試劑樣品提取液（8M尿素、2％非離子型去污劑NP－40、2％Ampholin，pH3.5-10、2％DTT）膠母液（30％的29/1的Acr/Bis），兩性電解質(zhì)陽極緩沖液1M磷酸陰極緩沖液1M氫氧化鈉固定液（10％的三氯、1％的磺基水楊酸）染色液（35％乙醇、10％冰醋酸、0.15%考馬氏亮藍(lán)R250）脫色液（35％乙醇、10％冰醋酸）實驗設(shè)備高壓電泳儀、IEF槽、離心機(jī)等實驗步驟1.樣品提取1)1ml原核表達(dá)細(xì)胞液離心取沉淀2)沉淀用100ulIEF樣品緩沖液裂解，離心取上清2.制膠1)
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實驗試劑丙酮、正己烷（J.T.Baker公司）均為農(nóng)殘級；甲醇（Fisherchemical公司）為色譜純；銅片為分析純(臨用時，先用6mol/L的鹽酸去除其氧化層，用去離子水洗至中性，然后依次用甲醇、丙酮、正己烷洗滌3次)；無水硫酸鈉為分析純（400℃烘4h，冷卻后儲于密閉容器中）；硅膠為分析純（先用甲醇洗滌，然后用二氯甲烷洗滌，在110℃烘干過；使用前在250℃烘24h，冷卻后儲于密閉容器中）。Florisil小柱（SUPELCO公司），1000mg(6mL)；20種有機(jī)氯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（Ac
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實驗原理ABO血型是根據(jù)紅細(xì)胞表面存在的凝集原決定的。存在A凝集原的稱為A血型，存在B凝集原的稱為B血型。而血清中還存在凝集素。當(dāng)A凝集原與抗A凝集素相遇或B凝集原與抗B凝集素相遇時，會發(fā)生紅細(xì)胞凝集反應(yīng)。一般A型標(biāo)準(zhǔn)血清中含有抗B凝集素，B型標(biāo)準(zhǔn)血清中含有抗A凝集素，因此可以用標(biāo)準(zhǔn)血清中的凝集素與被測者紅細(xì)胞反應(yīng)，以確定其血型。同種動物不同個體的紅細(xì)胞凝集稱為同族血細(xì)胞凝集作用。不同動物的血液互相混合有時也可產(chǎn)生紅細(xì)胞凝集，稱為異族血細(xì)胞凝集作用。對于動物的天然血型抗體了解不多，而且免疫效價也
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實驗原理霉菌菌絲較粗大，細(xì)胞易收縮變形，而且孢子很容易飛散，所以制標(biāo)本時常用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液。此染色液制成的霉菌標(biāo)本片其特點是：(a)細(xì)胞不變形；(b)具有殺菌防腐作用，且不易干燥，能保持較長時間；(c)溶液本身呈藍(lán)色，有一定染色效果。霉菌自然生長狀態(tài)下的形態(tài)，常用載玻片觀察，此法是接種霉菌孢子于載玻片上的適宜培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后用顯微鏡觀察。此外，為了得到清晰、完整、保持自然狀態(tài)的霉菌形態(tài)還可利用玻璃紙透析培養(yǎng)法進(jìn)行觀察。此法是利用玻璃紙的半透膜特性及透光性，將霉菌生長在覆蓋于瓊脂培養(yǎng)基表面的
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實驗原理動物T淋巴細(xì)胞表面具有結(jié)合異種動物紅細(xì)胞的受體，稱為E受體，在體外一定條件下，能與綿羊等動物的紅細(xì)胞結(jié)合，形成以T細(xì)胞為中心，紅細(xì)胞環(huán)繞在周圍，宛似一朵玫瑰花樣的花環(huán)，故取名為E玫瑰花環(huán)試驗(erythrocyterosettesassay)或自然花環(huán)形成試驗。凡能與RBC形成E花環(huán)的淋巴細(xì)胞稱E花環(huán)形成細(xì)胞(Erosetteformingcell，ERFC)。目前*綿羊紅細(xì)胞(SRBC)受體是人、騾、牛、山羊、豬等T淋巴細(xì)胞的特異標(biāo)志，ERFC就是T細(xì)胞。這種玫瑰花環(huán)形成不需任何物質(zhì)的
