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中性粒細胞（polymorphonuclearleukocyte，PMN）的功能包括粘附、移動、吞噬殺菌等，是機體天然免疫力的重要組成部分。試劑及材料1.白色葡萄球菌2.肉湯培養(yǎng)基3.鹼性美藍液操作方法1.菌液的制備將白色葡萄球菌接種于中，放37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)12h左右；置水浴中加熱100℃10min殺死細菌，用無菌生理鹽水稀釋成6×108細菌/ml備用；2.用血紅蛋白吸管吸取受試者耳垂或指血40μl，立即加入盛有20μl肝素（濃度為20U/ml）的潔凈凹玻片的凹孔內(nèi)，輕輕攪動混勻，再加上述葡萄球
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標簽：組織病理組織學技術(shù)包括、組織學制片技術(shù)、胚胎學制片技術(shù)、組織化學技術(shù)、熒光組化及免疫組化技術(shù)、組織培養(yǎng)技術(shù)、各種特殊顯微技術(shù)、電鏡組織學技術(shù)。組織學技術(shù)不但應(yīng)用于組織學本學科，并且廣泛應(yīng)用于其他多學科，如生物學、解剖學、病理學、腫瘤學、法醫(yī)學、臨床診斷學等。實驗方法石蠟切片法冰凍切片實驗方法原理石蠟切片是zui基本的切片技術(shù)，冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法（簡稱H.E.對染法）是組織切片zui常用的染色方法。這種方法適用范圍廣泛，對組織細胞的各種
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免疫學技術(shù)專題：染色質(zhì)免疫沉淀芯片（Chip-Chip）
該技術(shù)能夠快速在目標基因組的染色體中確定特異DNA結(jié)合蛋白的準確結(jié)合位點，ChIP芯片也可以在一個基因組的任何感興趣的區(qū)域內(nèi)尋找染色體的結(jié)構(gòu)改變。一、ChIP-Chip的用途（1）在基因組范圍內(nèi)確定基因轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合位點和其他DNA結(jié)合蛋白或蛋白復(fù)合體的DNA結(jié)合位點。（2）染色體活性狀態(tài)的定量分析。（3）組蛋白修飾的功能研究。通過用?；蚣谆慕M蛋白的特異抗體和沒有進行修飾的組蛋白的特異抗體，可以確定與組蛋白修飾有關(guān)的結(jié)合模式的變化。（4）聚合酶活性的定量分析。（5）精煉生物信息方法 -
免疫學技術(shù)專題：斑點金免疫滲濾測定法（DIGFA）
基本原理斑點金免疫滲濾測定法是在斑點免疫滲濾測定法基礎(chǔ)上，改用膠體金標記物代替酶，省去底物顯色的步驟。試驗方法是以硝酸纖維素膜（NC膜）為載體，將試劑及標本滴加在膜上，通過滲濾而逐步反應(yīng)。全過程可于數(shù)分鐘內(nèi)完成，陽性結(jié)果在膜上呈紅色斑點。試劑及材料1.滲濾裝置：為一塑料小盒（4x3x0.6cm），分為底、蓋兩層，蓋的中央有一個直徑0.5cm的小孔。盒底充填吸水性較強的墊料，蓋孔下，緊貼墊料放置一片NC膜。緊閉盒蓋，即為滲濾裝置。在孔中的NC膜上點加1-2ml特異性抗體(一抗)或抗原，室溫自然干燥 -
標簽：流式細胞儀流式細胞儀（flowcytometer）是一種能夠探測和計數(shù)以單細胞液體流形式穿過激光束的細胞檢測裝置，由于在檢測中使用的細胞標志示蹤物質(zhì)為熒光標記物，因此，用來分離、鑒定細胞的流式細胞儀有被稱為熒光激活細胞分類儀，是分離和鑒定細胞群及亞群的一種強而有力的應(yīng)用工具。實驗方法流式細胞儀實驗方法原理流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。*，是儀器前階段，包括試劑的準備，細胞制備、細胞的熒光染色；第二，是流式細胞儀階段，主要是儀器的操作；第三，是結(jié)果分析階段。實驗材料淋巴細胞外周血的白細胞
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一.細胞復(fù)蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細胞懸液，于1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養(yǎng)基質(zhì)混勻細胞沉淀，再1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘，棄上清，細胞沉淀用1.0ml培養(yǎng)基混勻，備用。另取一個75cm2方瓶，加入14.0ml培養(yǎng)基質(zhì)，將上述制備的含腫瘤細胞懸液(1.0ml)加入此方瓶中，于37℃，5%CO2孵育箱中培養(yǎng)。若此腫瘤細胞懸浮生長，大約3－4天細胞基質(zhì)會變黃，5.0ml細胞懸液可傳代一個方瓶培養(yǎng)，可用3
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一、實驗前應(yīng)明確的問題1.選擇適當?shù)募毎臃N濃度。一般情況下，96孔培養(yǎng)板的一內(nèi)貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預(yù)實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數(shù)條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數(shù)和培養(yǎng)時間，以保證培養(yǎng)終止致細胞過滿。這樣，才能保證MTT結(jié)晶形成酌量與細胞數(shù)呈的線性關(guān)系。否則細胞數(shù)太多敏感性降低，太少觀察不到差異。2.藥物濃度的設(shè)定。一定要多看文獻，參考別人的結(jié)果再定個比較大的范圍先初篩。根據(jù)自己初篩的結(jié)果縮
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標簽：酶聯(lián)免疫吸附ELISA酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）可以：（1）免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。（2）研究抗酶抗體的合成。（3）顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。（4）定量檢測體液中抗原或抗體成份。實驗方法雙抗體夾心法（測抗原）間接法（測抗體）競爭法測抗原實驗方法原理圖1.雙抗體夾心法測抗原示意圖本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經(jīng)洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應(yīng)抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結(jié)合，經(jīng)保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經(jīng)孵育洗滌后，加底物顯色
