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ATCC專(zhuān)題：實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌操作
（一）無(wú)菌操作前的準(zhǔn)備工作培養(yǎng)材料接種時(shí)的無(wú)菌操作過(guò)程除上述各項(xiàng)消毒滅菌操作外，還需完成以下無(wú)菌操作步驟，從而獲得接種的無(wú)菌培養(yǎng)材料。工作人員無(wú)菌操作前需用肥皂刷洗雙手及手臂，并用流水沖凈，并對(duì)手臂消毒后穿戴好滅菌工作服、工作帽和口罩，更換拖鞋，才能進(jìn)入無(wú)菌操作區(qū)。如進(jìn)入層流操作室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，應(yīng)完成緩沖準(zhǔn)備區(qū)內(nèi)的淋浴、一次更換滅菌衣帽、拖鞋；手臂消毒、二次更換滅菌防護(hù)衣帽、手套、拖鞋等；再在風(fēng)淋區(qū)進(jìn)行無(wú)菌風(fēng)淋后方可進(jìn)入層流操作室。進(jìn)入無(wú)菌操作區(qū)后，再用70%～75%的酒精擦拭雙手和前臂，完成無(wú) -
ATCC專(zhuān)題：食品中菌落總數(shù)的測(cè)定
食品中菌落總數(shù)的測(cè)定，目的在于了解食品在生產(chǎn)中，從原料加工到成品包裝受外界污染的情況；也可以應(yīng)用這一方法觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動(dòng)態(tài)，確定食品的保存期，以便對(duì)被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù)。食品有可能被多種類(lèi)群的微生物所污染，每種細(xì)菌都有它一定的生理特性，培養(yǎng)時(shí)應(yīng)用不同的營(yíng)養(yǎng)條件及其生理?xiàng)l件（如溫度、培養(yǎng)時(shí)間、PH值、需氧性質(zhì)等）去滿足其要求，才能分別將各種細(xì)菌培養(yǎng)出來(lái)。但在實(shí)際工作中，一般都只用一種常用的方法去作菌落總數(shù)的測(cè)定，所得結(jié)果，只包括一群能在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上發(fā)育的嗜中溫性需氧菌的菌落數(shù)。國(guó) -
轉(zhuǎn)染，是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專(zhuān)門(mén)技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類(lèi)途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過(guò)物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例；化學(xué)介導(dǎo)方法很多，如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽(yáng)離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)；生物介導(dǎo)方法，有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染，和現(xiàn)在比較多見(jiàn)的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。理想細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法，應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)，是目前轉(zhuǎn)染效率zui
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專(zhuān)題：轉(zhuǎn)染（transfection）--轉(zhuǎn)染試劑的選擇
下面我們?yōu)榇蠹姨峁┮恍┏Ｓ弥|(zhì)體試劑的適用細(xì)胞系信息以及轉(zhuǎn)染FAQs：1.promega公司Promega轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品適合于人HeLa，HepG2，293，K562，Jurkat；猴COS-7，CV-1；小鼠NIH3T3；倉(cāng)鼠BHK，CHO；大鼠PC12；昆蟲(chóng)S19等等細(xì)胞系的RNAi轉(zhuǎn)染。詳情請(qǐng)參閱http：//www.promega.com.cn/files/cpxl/zhuanran/zhuanran.htm2.Invitrogen公司根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，我公司推薦您使用Invitrogen公司生產(chǎn) -
專(zhuān)題：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析研究的步驟
1．瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析法目前有很多功能性分析方法用于研究轉(zhuǎn)錄調(diào)控，zui常用的方法是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析法。該方法是通過(guò)一定的轉(zhuǎn)染程序?qū)⒑康恼{(diào)控區(qū)的質(zhì)粒導(dǎo)人培養(yǎng)細(xì)胞。在典型情況下，調(diào)控區(qū)調(diào)控“報(bào)告基因”的轉(zhuǎn)錄。報(bào)告基因是在mRNA和蛋白質(zhì)的水平上都易于被正確檢測(cè)到的基因。產(chǎn)生的質(zhì)粒在培養(yǎng)細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄后，在特定時(shí)刻測(cè)定從報(bào)告基因上合成的mRNA或蛋白質(zhì)，以評(píng)價(jià)調(diào)控區(qū)的活性。人們將這種分析方法稱(chēng)為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析，因?yàn)榇藭r(shí)質(zhì)粒仍然以附加的形式存在，很少整合進(jìn)宿主基因組。因此，mRNA或蛋白質(zhì)產(chǎn)物必須在短時(shí)間內(nèi)（1～3 -
專(zhuān)題：轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)
將制備好的siRNA，siRNA表達(dá)載體或表達(dá)框架轉(zhuǎn)導(dǎo)至真核細(xì)胞中的方法主要有以下幾種：1.磷酸鈣共沉淀將氯化鈣，RNA（或DNA）和磷酸緩沖液混合，沉淀形成包含DNA且極小的不溶的磷酸鈣顆粒。磷酸鈣-DNA復(fù)合物粘附到細(xì)胞膜并通過(guò)胞飲進(jìn)入目的細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)。沉淀物的大小和質(zhì)量對(duì)于磷酸鈣轉(zhuǎn)染的成功至關(guān)重要。在實(shí)驗(yàn)中使用的每種試劑都必須小心校準(zhǔn)，保證質(zhì)量，因?yàn)樯踔疗x*條件十分之一個(gè)pH都會(huì)導(dǎo)致磷酸鈣轉(zhuǎn)染的失敗。2.電穿孔法電穿孔通過(guò)將細(xì)胞暴露在短暫的高場(chǎng)強(qiáng)電脈沖中轉(zhuǎn)導(dǎo)分子。將細(xì)胞懸浮液置于電場(chǎng)中會(huì) -
專(zhuān)題:脂質(zhì)體介導(dǎo)DNA轉(zhuǎn)染法
脂質(zhì)體（lipofectinregeant,LR）試劑是陽(yáng)離子脂質(zhì)體N-[1-2，3-Dioleyoxy,Propyl]-n,n,n-TrimethylammoniumChloride（DOTMA）和Dioleoylphotidye-thanolamine（DOPE）的混合物[1:1（w/w）]。它適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，是目前條件下zui方便的轉(zhuǎn)染方法之一。轉(zhuǎn)染率高，優(yōu)于磷酸鈣法，比它高5～100倍，能把DNA和RNA轉(zhuǎn)染到各種細(xì)胞。用LR進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，首先需優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，應(yīng)找 -
ELISPOT技術(shù)的*優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)讓它在抗原特異性T細(xì)胞免疫學(xué)研究上*。它是當(dāng)今*能夠檢測(cè)到到百萬(wàn)分之一陽(yáng)性細(xì)胞率的檢測(cè)技術(shù)。如此高的靈敏度就連流式細(xì)胞技術(shù)（細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色）和tetramer技術(shù)也*（LetschAet.al.，2003）。此外由于淋巴細(xì)胞的凍存復(fù)蘇問(wèn)題也得到了的解決，經(jīng)過(guò)凍存復(fù)蘇的細(xì)胞并不喪失免疫功能（MaeckerHTet.al.，2005；KvarnstromMet.al.，2004）。這一點(diǎn)對(duì)臨床試驗(yàn)非常重要，它使科研人員得以并行分析免疫治療前、后的病人血樣。如果試驗(yàn)牽
