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1. 紫外燈下仔細(xì)切下含待回收DNA的膠條,將切下的膠條(小于0.6g)搗碎,置于1.5ml離心管中;
2. 加入等體積的Tris-HCl飽和酚(pH 7.6),振蕩混勻;
3. -20℃放置5-10min;
4. 4℃離心10000g×5min,上層液轉(zhuǎn)移置另一離心管中;
5. 加入1/4體積H2O于含膠的離心管中,振蕩混勻;
6. -20℃,放置5-10min;
7. 4℃離心10000g×5min,合并上清液;
8. 用等體積酚/氯仿、氯仿分別抽提一次,取上清;
9. 加入1/10體積3M NaAc(pH 5.2)、2.5倍體積預(yù)冷的無(wú)水乙醇,混勻;
10. -20℃,靜置30min;
11. 4℃離心13000g×10min,棄上清,75%乙醇洗沉淀1-2次,晾干;
12. 加適量H2O或TE溶解沉淀。