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中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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細(xì)胞因子分子
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【技術(shù)】教你如何達(dá)到提取RNA的最高境界!2021/8/31
免除RNase的困擾RNA分子異常脆弱,很容易就會(huì)被無(wú)處不在的RNase降解,輕輕松松的就讓實(shí)驗(yàn)人員的種種努力付之東流。尤其是當(dāng)樣品極其稀少且珍貴時(shí),RNA的降解更是讓各位小伙伴們想自掛東南枝。因而R...
RNA Trizol 抽提步驟2021/8/30
PCR、qRT-PCR最最初始,都離不開(kāi)RNA的抽提,RNA質(zhì)量的好壞,直接影響到后續(xù)的反轉(zhuǎn)錄及PCR等過(guò)程。很多時(shí)候,小伙伴們明明跟著Trizol步驟一步一步來(lái)的,謹(jǐn)小慎微,不敢懈怠,但就是RNA抽...
【干貨】RNA抽提原理和流程2021/8/30
現(xiàn)在我們所熟知的TRIzol是LifeTechnologies公司的商品名,而同樣的試劑在PiotrChomczynski創(chuàng)辦的MRC公司則被命名為RNAzol(據(jù)PiotrChomczynski透露...
【RNA提取】RNA抽提的三大紀(jì)律八項(xiàng)注意!2021/8/30
今天我們談一談RNA抽提的問(wèn)題。為了方便大家記憶,總結(jié)出了“三大紀(jì)律八項(xiàng)注意”。紀(jì)律一:無(wú)外源酶的污染。外源酶會(huì)造成RNA的降解,造成RNA得率太低,或者*失敗。而外源酶又是無(wú)處不在的。這就要求注意以...
基因研究做引物設(shè)計(jì),一定要知道轉(zhuǎn)錄本能干什么!2021/8/30
我們平常通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)查找某個(gè)基因的相關(guān)信息時(shí),會(huì)發(fā)現(xiàn)該基因有多個(gè)轉(zhuǎn)錄本。為什么一個(gè)基因可以有多個(gè)轉(zhuǎn)錄本呢?轉(zhuǎn)錄本能干什么?轉(zhuǎn)錄本其實(shí)就是基因通過(guò)轉(zhuǎn)錄形成的一種或多種可供編碼蛋白質(zhì)的成熟的mRNA。一個(gè)基...
RNA反轉(zhuǎn)錄又失敗了?填坑還得看這六大要素!2021/8/30
老話說(shuō)的好,萬(wàn)事開(kāi)頭難。而這話在RT-PCR中則較為體現(xiàn)出來(lái),其開(kāi)頭的第一步——將RNA反轉(zhuǎn)為cDNA,表面上看似簡(jiǎn)單,實(shí)際上則暗潮洶涌,指不定就在哪里挖個(gè)坑,就會(huì)讓斗志高昂的實(shí)驗(yàn)汪們摔的鼻青臉腫,而...
RNA轉(zhuǎn)錄的實(shí)驗(yàn)方法選擇和步驟2021/8/27
正規(guī)化管理的實(shí)驗(yàn)室都會(huì)給新人進(jìn)行相關(guān)技能體系的培訓(xùn),但是被老板散養(yǎng)的研究僧或者無(wú)奈從0開(kāi)始做科研的臨床醫(yī)生也不在少數(shù)。他們?cè)诔跏冀佑|分子實(shí)驗(yàn)時(shí),手持《現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》這本寶典,很容易被五花繚亂...
新型RNAi載體——saiRNA,更為安全的高效RNA干擾載體!2021/8/27
RNAi技術(shù)的前世今生造物真的很神奇。生物體有很多機(jī)會(huì)被來(lái)自病毒、細(xì)菌等外源性基因隨機(jī)整合到宿主細(xì)胞基因組內(nèi)。但宿主會(huì)說(shuō),“你有張良計(jì)我有過(guò)墻梯”,這個(gè)過(guò)墻梯就是RNAi:宿主細(xì)胞會(huì)對(duì)這些外源性基因d...
【RNAi與siRNA技術(shù)】基因敲除鼠的實(shí)驗(yàn)建議2021/8/27
如果是在做動(dòng)物實(shí)驗(yàn),而且是基因敲除鼠的實(shí)驗(yàn),那么就會(huì)做大批量的小鼠基因型鑒定試驗(yàn),來(lái)確定自己小鼠的基因型,然而,再做實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中往往會(huì)出現(xiàn)一些意想不到的結(jié)果,在這里為大家提一點(diǎn)點(diǎn)小建議。提取DNA1、...
一篇就夠了,帶你了解高通量測(cè)序!2021/8/27
說(shuō)到近十年來(lái)發(fā)展最迅猛的生物技術(shù),首先想到了高通量測(cè)序,我們研究基因組學(xué)都離不開(kāi)它。目前,高通量測(cè)序已經(jīng)深入到生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,不僅有力地推動(dòng)了基礎(chǔ)研究的發(fā)展,也在逐漸征服臨床應(yīng)用。所謂的高通量測(cè)序...
避免踩坑,注意別踩DNA測(cè)序里的大坑!2021/8/27
DNA測(cè)序技術(shù)自從發(fā)明以來(lái),作為一種重要的分子生物學(xué)手段,正在科研和臨床上得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。下面,介紹一下DNA測(cè)序里的大坑。給大家一個(gè)前車(chē)之鑒吧??右唬盒盘?hào)衰減/中斷測(cè)序信號(hào)衰減和中斷,是測(cè)序...
DNA 甲基化測(cè)序常用方法2021/8/26
隨著高通量測(cè)序技術(shù)(NGS)技術(shù)的發(fā)展,使我們能夠從全基因組水平來(lái)分析5’甲基胞嘧啶及組蛋白修飾等事件,由此能夠發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)的基因組學(xué)研究所不能發(fā)現(xiàn)的東西,這就是所謂的“DNA甲基化測(cè)序”!DNA甲基...
電泳中的異?,F(xiàn)象及其原因分析2021/8/26
跑電泳是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本技術(shù)。只要做分子生物學(xué)方面的實(shí)驗(yàn),可能或多或少,或早或晚都要跑跑電泳。有時(shí)候,跑電泳跑著跑著也會(huì)出現(xiàn)一些奇奇怪怪的現(xiàn)象。下面,談一談跑電泳的過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生的異?,F(xiàn)象,...
【DNA 電泳】教你做果凍:瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)技巧分享2021/8/26
果凍晶瑩剔透,口感QQ的,其實(shí)果凍的原料瓊脂糖,也是我們平時(shí)用來(lái)跑電泳的材料,瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)常用以DNA切膠回收,DNA分離和用于佐證DNA是否重組、質(zhì)粒等是否切開(kāi)。今天我們就來(lái)聊聊瓊脂糖凝膠電泳...
【教程】構(gòu)建載體其實(shí)一點(diǎn)也不難!2021/8/26
我們?cè)谘芯炕虻墓δ軙r(shí),逃脫不掉的就是為了我們的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,可能需要?gòu)建各種載體,比如表達(dá)載體,克隆載體,基因打靶載體等等。很多人在構(gòu)建載體的時(shí)候都感覺(jué)很困難,特別是對(duì)于一個(gè)剛進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的新人來(lái)說(shuō)那更是...

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