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認識黑膠蟲的真面目(上)

時間:2022/1/4閱讀:3047
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江湖上流傳很久的黑膠蟲,到底真實身份是啥?

今天讓我們一起來扒一扒~


我們收集了全國29個黑膠蟲污染樣本進行DNA提取、測序、數(shù)據(jù)庫比對,得到了鑒定結(jié)果,一起和大家分享一下吧。



表:黑膠蟲檢定

微生物種屬樣本數(shù)
G+/G-形狀
直徑大小
Mycoplasma  hyorhinis
(豬鼻支原體)
3//0.15~0.3 μm
Mycoplasma bovis
(牛支原體)
1//0.15~0.3 μm
Mycoplasma pulmonis
(鼠肺支原體株)
1
//0.15~0.3 μm
Mycoplasma yeatsii
(山羊支原體)
6
//0.15~0.3 μm
Actinobacterium sp.
(放線菌屬)
1G+絲狀寬度近于桿狀細菌,直徑0.5~1 μm
Ralstonia sp.
(羅爾斯通菌屬)
1G-桿狀1.2×2.5~3.5 μm
Brevundimonas sp.
(短波單胞菌屬)
1G-桿狀0.4~0.5×1-2 μm
Blastomonas natatoria
(泳池芽殖單胞菌)
1G-卵圓形或桿狀/
Pseudomonas sp.
(假單胞菌)
1
G-桿狀(0.5~1)×(1.5~4) μm
Sphingobium sp.
(鞘脂菌屬)
1G-桿狀/
Sphingomonas sp.
(鞘氨醇單胞菌)
5
G-桿狀0.3~0.8×1.0~2.7 μm
Methylobacillus sp.
(甲基菌屬)
1G-桿狀0.8~1.0×1.0~8.0 μm
Microbacterium sp.
(微桿菌屬)
2G+桿狀1~10×0.2~0.6 μm
Herbaspirillumhuttiense
(赫氏草螺菌)
4G-螺旋型長度至數(shù)十微米;螺旋波長為5~15 μm,螺旋幅度約一乃至數(shù)微米


如上表格所示:在這29個樣本中,有11個樣本鑒定為支原體,種類分別為豬鼻支原體、牛支原體、鼠肺支原體、山羊支原體。18個樣本鑒定為細菌,種類分別為放線菌屬、羅爾斯通菌屬、短波單胞菌屬、泳池芽殖單胞菌、假單胞菌、鞘氨醇單胞菌、甲基菌屬、微桿菌屬、赫氏草羅菌。



支原體污染 


本次實驗中,有11個樣本鑒定為支原體污染。首先,我們先來了解一下支原體的基本特征。

逍鵬生物實驗室在做沉降菌檢測的時候,竟然出乎意外地培養(yǎng)出了一株支原體。支原體集落呈“荷包蛋樣":圓形,核心部分較厚,向下長入培養(yǎng)基,周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。

圖片

圖1. 支原體菌落

圖片

圖2. 電鏡下的支原體

圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用


在電子顯微鏡下,支原體大小為0.15~0.3 μm,無細胞壁,不能維持固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性,呈球形、球桿形、長絲狀及分支狀等。


豬鼻支原體  


圖片

圖3. 固體培養(yǎng)基上的豬鼻支原體集落

圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用


鑒定結(jié)果:樣本1,6,15 為 Mycoplasma hyorhinis(豬鼻支原體)

大小:0.15~0.3 μm

感染宿主:其感染豬的上呼吸系統(tǒng)的上皮細胞,通過口鼻途徑傳播。小豬可以被母豬或它們的同伴(無癥狀攜帶者)感染

污染細胞途徑:推測胰蛋白酶主要是從豬的胰臟提取,純化獲得的結(jié)晶,再制成的凍干制劑,過濾除菌不當?shù)囊让溉芤嚎赡軘y帶豬鼻支原體,建議大家買品牌胰酶,降低污染風(fēng)險


鼠肺支原體  


圖片

圖4. 固體培養(yǎng)基上的鼠肺支原體株

圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用


鑒定結(jié)果:樣本12 為 Mycoplasma pulmonis(鼠肺支原體)

大?。?.15~0.3 μm

感染宿主:大鼠和小鼠是主要的宿主。寄生于呼吸道上皮頂膜,附著感染從鼻前通道到肺泡的任何地方,可能是由表面糖蛋白介導(dǎo)的

污染細胞途徑:在提取鼠源的細胞,例如鼠巨噬細胞,鼠肺動脈上皮細胞,鼠原代海馬神經(jīng)元時,如果提取的鼠帶有鼠肺支原體,就有可能會引入污染


牛支原體  


圖片

圖5. 固體培養(yǎng)基上的牛支原體株

圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用


鑒定結(jié)果:樣本28 為 Mycoplasma bovis(牛支原體)

大?。?.15~0.3 μm

感染宿主:主要寄生于牛體內(nèi),感染部位廣泛,感染牛的呼吸道,會引起肺炎、中耳炎、關(guān)節(jié)炎、結(jié)膜炎

污染細胞途徑:推測細胞增殖的主要營養(yǎng)之一就是胎牛血清。胎牛血清來源于動物,其主要通過0.1μm濾膜過濾除菌。如果血源及過濾除菌不當,就會給細胞帶來潛在的支原體污染,因此建議大家購買品牌的胎牛血清

山羊支原體  //


圖片

圖6. 固體培養(yǎng)基上的山羊支原體株

圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用


鑒定結(jié)果:樣本9,10,17,18,19,20 為Mycoplasma yeatsii(山羊支原體)

大?。?.15~0.3 μm

感染宿主:主要寄生于山羊體內(nèi),感染部位廣泛,寄生于羊的外耳道,咽后淋巴結(jié)、肺、脾

污染細胞途徑:此類污染來源異常詭異,因為大家平時培養(yǎng)的細胞來源或營養(yǎng)體系,很難接觸到此類污染的環(huán)節(jié),故很難推測到污染源頭。若培養(yǎng)相關(guān)的細胞或者使用相關(guān)的營養(yǎng)體系,就比較容易推測污染來源了


//  小結(jié)  //

如果黑膠蟲的真實身份是支原體,那么支原體本身不會游動,不符合黑膠蟲污染活躍游動或原地打轉(zhuǎn)、顫動的特征,故推測可能細胞本身存在潛在的支原體污染,剛好被檢測出來了。


以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


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安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。


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