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江湖上流傳很久的黑膠蟲,到底真實身份是啥?
今天讓我們一起來扒一扒~
我們收集了全國29個黑膠蟲污染樣本進行DNA提取、測序、數(shù)據(jù)庫比對,得到了鑒定結(jié)果,一起和大家分享一下吧。
表:黑膠蟲檢定
微生物種屬 | 樣本數(shù) | G+/G- | 形狀 | 直徑大小 |
Mycoplasma hyorhinis (豬鼻支原體) | 3 | / | / | 0.15~0.3 μm |
Mycoplasma bovis (牛支原體) | 1 | / | / | 0.15~0.3 μm |
Mycoplasma pulmonis (鼠肺支原體株) | 1 | / | / | 0.15~0.3 μm |
Mycoplasma yeatsii (山羊支原體) | 6 | / | / | 0.15~0.3 μm |
Actinobacterium sp. (放線菌屬) | 1 | G+ | 絲狀 | 寬度近于桿狀細菌,直徑0.5~1 μm |
Ralstonia sp. (羅爾斯通菌屬) | 1 | G- | 桿狀 | 1.2×2.5~3.5 μm |
Brevundimonas sp. (短波單胞菌屬) | 1 | G- | 桿狀 | 0.4~0.5×1-2 μm |
Blastomonas natatoria (泳池芽殖單胞菌) | 1 | G- | 卵圓形或桿狀 | / |
Pseudomonas sp. (假單胞菌) | 1 | G- | 桿狀 | (0.5~1)×(1.5~4) μm |
Sphingobium sp. (鞘脂菌屬) | 1 | G- | 桿狀 | / |
Sphingomonas sp. (鞘氨醇單胞菌) | 5 | G- | 桿狀 | 0.3~0.8×1.0~2.7 μm |
Methylobacillus sp. (甲基菌屬) | 1 | G- | 桿狀 | 0.8~1.0×1.0~8.0 μm |
Microbacterium sp. (微桿菌屬) | 2 | G+ | 桿狀 | 1~10×0.2~0.6 μm |
Herbaspirillumhuttiense (赫氏草螺菌) | 4 | G- | 螺旋型 | 長度至數(shù)十微米;螺旋波長為5~15 μm,螺旋幅度約一乃至數(shù)微米 |
如上表格所示:在這29個樣本中,有11個樣本鑒定為支原體,種類分別為豬鼻支原體、牛支原體、鼠肺支原體、山羊支原體。18個樣本鑒定為細菌,種類分別為放線菌屬、羅爾斯通菌屬、短波單胞菌屬、泳池芽殖單胞菌、假單胞菌、鞘氨醇單胞菌、甲基菌屬、微桿菌屬、赫氏草羅菌。
支原體污染
本次實驗中,有11個樣本鑒定為支原體污染。首先,我們先來了解一下支原體的基本特征。
逍鵬生物實驗室在做沉降菌檢測的時候,竟然出乎意外地培養(yǎng)出了一株支原體。支原體集落呈“荷包蛋樣":圓形,核心部分較厚,向下長入培養(yǎng)基,周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。
圖1. 支原體菌落
圖2. 電鏡下的支原體
圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用
在電子顯微鏡下,支原體大小為0.15~0.3 μm,無細胞壁,不能維持固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性,呈球形、球桿形、長絲狀及分支狀等。
豬鼻支原體
圖3. 固體培養(yǎng)基上的豬鼻支原體集落
圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用
鑒定結(jié)果:樣本1,6,15 為 Mycoplasma hyorhinis(豬鼻支原體)
大小:0.15~0.3 μm
感染宿主:其感染豬的上呼吸系統(tǒng)的上皮細胞,通過口鼻途徑傳播。小豬可以被母豬或它們的同伴(無癥狀攜帶者)感染
污染細胞途徑:推測胰蛋白酶主要是從豬的胰臟提取,純化獲得的結(jié)晶,再制成的凍干制劑,過濾除菌不當?shù)囊让溉芤嚎赡軘y帶豬鼻支原體,建議大家買品牌胰酶,降低污染風(fēng)險
鼠肺支原體
圖4. 固體培養(yǎng)基上的鼠肺支原體株
圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用
鑒定結(jié)果:樣本12 為 Mycoplasma pulmonis(鼠肺支原體)
大?。?.15~0.3 μm
感染宿主:大鼠和小鼠是主要的宿主。寄生于呼吸道上皮頂膜,附著感染從鼻前通道到肺泡的任何地方,可能是由表面糖蛋白介導(dǎo)的
污染細胞途徑:在提取鼠源的細胞,例如鼠巨噬細胞,鼠肺動脈上皮細胞,鼠原代海馬神經(jīng)元時,如果提取的鼠帶有鼠肺支原體,就有可能會引入污染
牛支原體
圖5. 固體培養(yǎng)基上的牛支原體株
圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用
鑒定結(jié)果:樣本28 為 Mycoplasma bovis(牛支原體)
大?。?.15~0.3 μm
感染宿主:主要寄生于牛體內(nèi),感染部位廣泛,感染牛的呼吸道,會引起肺炎、中耳炎、關(guān)節(jié)炎、結(jié)膜炎
污染細胞途徑:推測細胞增殖的主要營養(yǎng)之一就是胎牛血清。胎牛血清來源于動物,其主要通過0.1μm濾膜過濾除菌。如果血源及過濾除菌不當,就會給細胞帶來潛在的支原體污染,因此建議大家購買品牌的胎牛血清
山羊支原體 //
圖6. 固體培養(yǎng)基上的山羊支原體株
圖源網(wǎng)絡(luò),僅供參考學(xué)習(xí)用
鑒定結(jié)果:樣本9,10,17,18,19,20 為Mycoplasma yeatsii(山羊支原體)
大?。?.15~0.3 μm
感染宿主:主要寄生于山羊體內(nèi),感染部位廣泛,寄生于羊的外耳道,咽后淋巴結(jié)、肺、脾
污染細胞途徑:此類污染來源異常詭異,因為大家平時培養(yǎng)的細胞來源或營養(yǎng)體系,很難接觸到此類污染的環(huán)節(jié),故很難推測到污染源頭。若培養(yǎng)相關(guān)的細胞或者使用相關(guān)的營養(yǎng)體系,就比較容易推測污染來源了
// 小結(jié) //
如果黑膠蟲的真實身份是支原體,那么支原體本身不會游動,不符合黑膠蟲污染活躍游動或原地打轉(zhuǎn)、顫動的特征,故推測可能細胞本身存在潛在的支原體污染,剛好被檢測出來了。
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