詳細(xì)介紹
*0化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
NovaBlue GigaSingle 適用于質(zhì)粒的克隆和復(fù)制,轉(zhuǎn)化效率高,產(chǎn)量高,同時能夠用于克隆構(gòu)建時的
藍(lán)白斑篩選。NovaBlue GigaSingle 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108
cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
CC96140-01
CC96140-02
CC96140-03
NovaBlue GigaSingle
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:endA1 hsdR17 (rK– mK+) supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lacF′ [proA+B+ lacIqZ ΔM15::Tn10]
(TetR)
*0化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
*0化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。
產(chǎn)品簡介
NovaBlue GigaSingle 適用于質(zhì)粒的克隆和復(fù)制,轉(zhuǎn)化效率高,產(chǎn)量高,同時能夠用于克隆構(gòu)建時的
藍(lán)白斑篩選。NovaBlue GigaSingle 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108
cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
CC96140-01
CC96140-02
CC96140-03
NovaBlue GigaSingle
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:endA1 hsdR17 (rK– mK+) supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lacF′ [proA+B+ lacIqZ ΔM15::Tn10]
(TetR)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。