2× FastTaq Premix 酶

是將PCR反應(yīng)中用到的FastTaq DNA聚合酶、buffer、dNTP Mixture以及穩(wěn)定劑以2倍的終濃度進(jìn)行混合。使用時(shí)，只需要在制品溶液中加入模板和引物便可進(jìn)行PCR反應(yīng)，大大簡化了操作過程，降低了PCR操作過程中污染的可能性。同Taq酶一樣，使用本品擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物的3'端也附有一個(gè)"A"堿基，因此，也可直接用于T-A克隆。針對(duì)目標(biāo)PCR產(chǎn)物在1.5Kb以下時(shí)，本Taq酶支持1s超快PCR延伸程序（72度延伸程序僅需1s)。

2× FastTaq Premix  酶

PCR 反應(yīng)體系：

* 針對(duì)不同類型的模板，所需的模板量會(huì)有不同，如基因組和質(zhì)粒，等等；需要根據(jù)實(shí)際情況，添加合

適的模板量。** 退火溫度需根據(jù)引物和模板實(shí)際的 G+C 含量來作調(diào)整；針對(duì)高 GC 模板，可適當(dāng)添加DMSO 至5%-10%。 

1. 在冰浴上設(shè)置 PCR 反應(yīng)（供參考）*：

模板: < 500 ng

2× FastTaq Premix: 25 μL

Primer 1/2: 0.2 - 1.0 μM (終濃度)

滅菌蒸餾水 Up to 50 μL

(臨時(shí)保存): 16 ℃ 保溫

2. PCR 反應(yīng)參數(shù)（供參考）**：

(起始變性): 95 ℃ 5 -10 min

(解鏈): 95 ℃ 30 sec

(退火): 55 ℃ 30 sec

(延伸 30-35 循環(huán)): 2 kb/min 或1 s 延伸（超

快延伸僅適用于產(chǎn)物＜1.5kb 時(shí)）

(終延伸): 72 ℃ 10 min 

* 針對(duì)不同類型的模板，所需的模板量會(huì)有不同，如基因組和質(zhì)粒，等等；需要根據(jù)實(shí)際情況，添加合

適的模板量。** 退火溫度需根據(jù)引物和模板實(shí)際的 G+C 含量來作調(diào)整；針對(duì)高 GC 模板，可適當(dāng)添加

DMSO 至5%-10%。