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高濃度的IL-2是提高TME浸潤(rùn)、逆轉(zhuǎn)腫瘤免疫抑制的重要炎癥細(xì)胞因子。如何在保證IL-2起效的同時(shí)降低IL-2的全身毒性是眾多實(shí)體瘤免疫療法開發(fā)的重要研究方向。2022年12月加州大學(xué)舊金山分校的研究團(tuán)隊(duì)在Science上展示了他們的方案。該臨床前試驗(yàn)選擇通過在T細(xì)胞上搭載合成細(xì)胞因子的通路,在體內(nèi)驅(qū)動(dòng),使細(xì)胞自主產(chǎn)生IL-2,盡可能使IL-2僅在目標(biāo)腫瘤TME中產(chǎn)生作用,降低全身毒性。局部合成IL-2的機(jī)制與效果為了讓IL-2不在全身擴(kuò)散,自主合成細(xì)胞因子回路需要在腫瘤TME的免疫抑制環(huán)境中依
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干貨 | 小動(dòng)物活體成像之生物發(fā)光精華篇
小動(dòng)物活體成像技術(shù),是在1999年美國(guó)哈佛大學(xué)Weisslede提出的一項(xiàng)技術(shù),該技術(shù)是指應(yīng)用影像學(xué)方法,對(duì)活體狀態(tài)下的生物過程進(jìn)行組織、細(xì)胞和分子水平的定性和定量研究。傳統(tǒng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需要在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)分批處死動(dòng)物以獲取實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),而小動(dòng)物活體成像技術(shù)可同時(shí)觀測(cè)多個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、對(duì)同一研究個(gè)體可進(jìn)行持續(xù)、反復(fù)跟蹤成像,避免動(dòng)物而造成的組間差異,節(jié)省動(dòng)物成本,被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域。其中小動(dòng)物活體光學(xué)成像是通過一定方式對(duì)小動(dòng)物進(jìn)行光學(xué)標(biāo)記,再通過成像技術(shù)及設(shè)備(如RevvityIVIS小動(dòng)物活體光學(xué) -
Lonza一體化端到端內(nèi)毒素自動(dòng)化檢測(cè)方案
內(nèi)毒素檢查是注射劑安全性檢查中的重要檢查項(xiàng)目,我們接受過的每一針注射劑都已經(jīng)過內(nèi)毒素污染檢測(cè)。隨著生物制藥的發(fā)展,內(nèi)毒素的檢測(cè)需求也日益增加,實(shí)驗(yàn)室需要更高效、更精準(zhǔn)的檢測(cè)方案來應(yīng)對(duì)日益增長(zhǎng)的檢測(cè)需求。然而,傳統(tǒng)的手動(dòng)檢測(cè)方法存在諸多局限,如操作繁瑣、易出錯(cuò)、費(fèi)人工等,這些問題限制了實(shí)驗(yàn)室的效率和檢測(cè)通量的提升。Lonza作為擁有幾十年內(nèi)毒素檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)的廠家,新近推出一體化端到端內(nèi)毒素自動(dòng)化檢測(cè)方案,不僅僅通過PyroTecPro™內(nèi)毒素自動(dòng)化工作流程解決測(cè)試過程中遇到的問題,還將MODA-EM™ -
Barkey推動(dòng)患者安全和實(shí)驗(yàn)室效率的創(chuàng)新
LizeteCaballero——加州大學(xué)舊金山分校血液和骨髓移植(BMT)實(shí)驗(yàn)室高級(jí)主管在美國(guó),37°C水浴是解凍細(xì)胞治療產(chǎn)品設(shè)備。這種方法需要手動(dòng)將產(chǎn)品直接浸入溫度控制的水中,按摩袋子,或旋轉(zhuǎn)小瓶,以確保解凍。最重要的是,對(duì)于水浴,人們普遍擔(dān)心外源性細(xì)菌對(duì)微生物的污染,這種污染會(huì)使本已脆弱的患者進(jìn)一步患病甚至死亡。LizeteCaballero一直關(guān)注質(zhì)量和創(chuàng)新,他曾在加州大學(xué)舊金山分校(UCSF)血液和骨髓移植實(shí)驗(yàn)室擔(dān)任高級(jí)主管近10年,現(xiàn)在是強(qiáng)生ChimericAntgen受體T細(xì)胞(C -
使用Victor NIVO多模式檢測(cè)已進(jìn)行快速Ca2+信號(hào)檢測(cè)
G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)參與許多細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。目前,超過45%的藥物都以GPCR為靶點(diǎn)。確定GPCR細(xì)胞活性,可以通過監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的變化來實(shí)現(xiàn)。Ca2+直接或間接調(diào)節(jié)包括基因表達(dá)、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和收縮在內(nèi)的許多生理過程。諸如蛋白激酶C(PKC)、轉(zhuǎn)錄因子NFAT或鈣調(diào)磷酸酶等多種蛋白質(zhì)均受Ca2+濃度變化的調(diào)節(jié)。在此,我們介紹了使用VICTOR™Nivo多模式讀板儀以水母發(fā)光蛋白生物發(fā)光檢測(cè)方法,分析在GPCR刺激或抑制下的快速胞內(nèi)Ca2+信號(hào)?;瘜W(xué)發(fā)光法檢測(cè)原理是基于GPCR的激活引 -
細(xì)胞螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)受多種因素影響,例如載體狀態(tài),細(xì)胞狀態(tài),轉(zhuǎn)染量,轉(zhuǎn)染效率,裂解效率,加樣精度等等,因此實(shí)驗(yàn)中一般需要做3個(gè)或以上復(fù)孔,且最好采用雙螢光素酶報(bào)告基因,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度?,F(xiàn)將雙螢光素酶實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中常見的問題匯總?cè)缦拢篞1:如何選擇載體?螢火蟲螢光素酶一般選取pGL-3、pGL-4或pmirGLO的載體,也可自己構(gòu)建相應(yīng)的載體;海腎螢光素酶一般選取phRL-TK或pGL-4載體,建議不使用強(qiáng)啟動(dòng)子(如SV40,CMV),而選取中等強(qiáng)度的啟動(dòng)子Q2:檢測(cè)結(jié)果螢光值過低或無螢光
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探索白介素IL-18的無限可能:功能、挑戰(zhàn)與應(yīng)用
IL-18的功能和挑戰(zhàn)免疫功能:IL-18作為一種IL-1家族的促炎細(xì)胞因子,和IL-12、IL-15一樣具有活化記憶樣NK細(xì)胞的功能。IL-18調(diào)節(jié)Th1和Th2細(xì)胞的反應(yīng),也作用于非極化T細(xì)胞、NK/NKT細(xì)胞、B細(xì)胞、DC和巨噬細(xì)胞,在IL-12存在的條件下產(chǎn)生IFN-γ。不含IL-12但含有IL-2的IL-18則可誘導(dǎo)CD4NKT細(xì)胞、NK細(xì)胞甚至已分化的Th1細(xì)胞產(chǎn)生Th2細(xì)胞因子。IL-18和IL-3還能誘導(dǎo)肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞產(chǎn)生IL-4和IL-13。除了免疫功能,IL-18還參 -
核酸酶能夠有效去除各種形式的DNA和RNA,是去除宿主細(xì)胞核酸(HostCellDNA,HCD)的理想手段。但來自粘質(zhì)沙雷氏菌的全能核酸酶(如Pannarase、Benzonase等產(chǎn)品)最適Na+/K+鹽濃度在0-20mM,有效范圍在0-150mM。多應(yīng)用于中低鹽濃度的HCD去除。如果在病毒制備中遇到高鹽條件,怎么更好的去除宿主細(xì)胞核酸?在高鹽環(huán)境下,不僅可以抑制病毒載體聚集、提升產(chǎn)量。因此,在有的病毒制備工藝中,常采用高鹽方法進(jìn)行細(xì)胞裂解來代替凍融裂解,釋放的病毒載滴度上會(huì)有提升。另外,高鹽