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大鼠白介素7(IL-7)Elisa試劑盒

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更新時間:2024-10-24 19:13:53瀏覽次數(shù):184

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨    
大鼠白介素7(IL-7)Elisa試劑盒吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體,適用多種標(biāo)本類型并節(jié)約成本。其高效、靈敏、特異的抗體與高效、靈敏、特異的抗體使實驗曲線更*。是一款可以讓您放心選購的ELISA試劑盒產(chǎn)品。

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品相關(guān)參數(shù)
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
產(chǎn)品有效期:zui長6個月,儲存條件2-8℃
產(chǎn)品特異性:大鼠白介素7(IL-7)Elisa試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品實驗設(shè)備:酶標(biāo)儀, 37℃恒溫箱,自動洗板機,可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭,蒸餾水,干凈的試管,容量瓶等。
大鼠白介素7(IL-7)Elisa試劑盒1.產(chǎn)品具有高效性、靈敏性、特異性等特點
2.產(chǎn)品的穩(wěn)定性和可靠性,檢測種屬有人,動物,植物,金標(biāo)ELISA試劑盒等
3.產(chǎn)品吸附均勻,吸附性能好,空白值低,孔底透明度高
4.產(chǎn)品適用于 血清、血漿、體液、尿液等各種樣本
5.產(chǎn)品質(zhì)量保證,由于產(chǎn)品本身質(zhì)量問題使實驗結(jié)果不理想,可以換貨或退貨
6. 公司與順豐快遞密切合作,保證了產(chǎn)品時效性與安全性
7.公司提供7*24小時,在實驗過程中遇到的任何問題我司高級技術(shù)人員會為你提供技術(shù)指導(dǎo)

【適用范圍】: 
1.適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型; 
2.可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞、蝦、魚等 
3.可檢測指標(biāo)齊全:白介素,干擾素,血管緊張素,肺炎衣原體,趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、炎癥因子、血管生成素 等等 指標(biāo) 

產(chǎn)品圖片
 

聲明 
1. 限于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平,尚不能對所有原料進行全面的鑒定分析,本產(chǎn)品可能存
在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。
2. zui終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請
務(wù)必準(zhǔn)備充足的待測樣品。
3. 只有全部使用試劑盒內(nèi)的試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)
格遵守本實驗說明才會得到*的檢測結(jié)果。
4. 有效期:6 個月。
【實驗準(zhǔn)備】:
1. ELISA試劑盒及待測樣本
2. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片) 
3. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭
4. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水 
5. 吸水紙
 
【標(biāo)本要求】:
1.血清: 
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 
2.血漿: 
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。 
3.尿液: 
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。 
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清: 
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。 
5.培養(yǎng)細(xì)胞: 
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 
6.組織標(biāo)本: 
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 
7.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融 
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 

大鼠白介素7(IL-7)Elisa試劑盒操作步驟】:
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,依次進行稀釋數(shù)倍。
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
 
【計算結(jié)果】:
      以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 
 
【操作事項】:
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.  加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請精確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
大鼠白介素7(IL-7)Elisa試劑盒其他相關(guān)產(chǎn)品 

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DN斷化
檢測    細(xì)胞凋亡時主要的生化特征是其染色質(zhì)發(fā)生濃縮, 染色質(zhì)DNA在核小體單位之間的連接處斷裂, 形成50~300kbp長, 或180~200bp整數(shù)倍的寡核苷酸片段, 在凝膠電泳上表現(xiàn)為梯形電泳圖譜(DNA ladder)。細(xì)胞經(jīng)處理后,采用常規(guī)方法分離提純DNA,進行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色,在凋亡細(xì)胞群中可觀察到典型的DNA ladder。如果細(xì)胞量很少,還可在分離提純DNA后,用32P-ATP和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)使DNA標(biāo)記,然后進行電泳和放射自顯影,觀察凋亡細(xì)胞中DNA ladder的形成。
    
    
Caspase家族活性的檢測    Caspase家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用。在正常狀態(tài)下, Caspase家族都以無活性的酶原(30~50kD)形式表達(dá),當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時Caspase可以被蛋白酶裂解,大亞基和小亞基形成活化的Caspase 。一些Caspase活化后可以次序激活其他Caspase形成Caspase級聯(lián)反應(yīng),促發(fā)細(xì)胞凋亡。在目前已知的14種Caspase中,Caspase-3、8和9與凋亡的關(guān)系zui為密切,在細(xì)胞凋亡中起執(zhí)行凋亡的作用。將Caspase序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團,當(dāng)該底物被特定的caspase剪切后,發(fā)色基團即游離出來,可通過酶標(biāo)儀或分光光度計(λ=405nm 或400nm)測定其吸光值,考察caspase的活化程度。
        
    
細(xì)胞周期及細(xì)胞增殖檢測    細(xì)胞壞死和凋亡是兩種截然不同的細(xì)胞學(xué)現(xiàn)象,二者發(fā)生的過程在形態(tài)學(xué)上有很大的區(qū)別。在細(xì)胞壞死時,細(xì)胞膜發(fā)生滲漏,細(xì)胞內(nèi)容物包括細(xì)胞器及染色質(zhì)釋放到胞外。而在細(xì)胞凋亡過程,起始階段,染色質(zhì)固縮、分離并沿核膜分布,細(xì)胞質(zhì)亦發(fā)生固縮,但細(xì)胞膜依然完整未失去選擇透性;在凋亡后期,核染色質(zhì)斷裂為大小不等的片斷,與某些細(xì)胞器如線粒體一起聚集,為反折的細(xì)胞膜包圍,后逐漸分離,形成凋亡小體。

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