產(chǎn)品相關(guān)參數(shù)
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
產(chǎn)品有效期：zui長6個月，儲存條件2-8℃
產(chǎn)品特異性：大鼠腦紅蛋白(NGB)Elisa試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品實驗設(shè)備：酶標(biāo)儀， 37℃恒溫箱，自動洗板機，可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭，蒸餾水，干凈的試管，容量瓶等。
大鼠腦紅蛋白(NGB)Elisa試劑盒1.產(chǎn)品具有高效性、靈敏性、特異性等特點
2.產(chǎn)品的穩(wěn)定性和可靠性，檢測種屬有人，動物，植物，金標(biāo)ELISA試劑盒等
3.產(chǎn)品吸附均勻，吸附性能好，空白值低，孔底透明度高
4.產(chǎn)品適用于 血清、血漿、體液、尿液等各種樣本
5.產(chǎn)品質(zhì)量保證，由于產(chǎn)品本身質(zhì)量問題使實驗結(jié)果不理想，可以換貨或退貨
6. 公司與順豐快遞密切合作，保證了產(chǎn)品時效性與安全性
7.公司提供7*24小時，在實驗過程中遇到的任何問題我司高級技術(shù)人員會為你提供技術(shù)指導(dǎo)

【適用范圍】： 
1．適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型； 
2．可檢測動物類型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞、蝦、魚等 
3．可檢測指標(biāo)齊全：白介素，干擾素，血管緊張素，肺炎衣原體，趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、炎癥因子、血管生成素 等等 指標(biāo) 

產(chǎn)品圖片
 

聲明 
1. 限于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平，尚不能對所有原料進行全面的鑒定分析，本產(chǎn)品可能存
在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。
2. zui終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān)，請
務(wù)必準(zhǔn)備充足的待測樣品。
3. 只有全部使用試劑盒內(nèi)的試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴
格遵守本實驗說明才會得到*的檢測結(jié)果。
4. 有效期：6 個月。
【實驗準(zhǔn)備】：
1. ELISA試劑盒及待測樣本
2. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片) 
3. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭
4. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水 
5. 吸水紙
 
【標(biāo)本要求】：
1.血清： 
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 
2.血漿： 
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。 
3.尿液： 
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。 
4.細胞培養(yǎng)上清： 
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。 
5.培養(yǎng)細胞: 
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 
6.組織標(biāo)本: 
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。 
7.標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融 
8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 

【大鼠腦紅蛋白(NGB)Elisa試劑盒操作步驟】：
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，依次進行稀釋數(shù)倍。
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液：將30倍（48T 的20 倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
 
【計算結(jié)果】：
      以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。 
 
【操作事項】：
1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.  加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時，*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間（包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品）控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進行下步操作，任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請精確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置（如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl），以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化（比如，每隔10分鐘），如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
大鼠腦紅蛋白(NGB)Elisa試劑盒其他相關(guān)產(chǎn)品 

DNA損傷試劑盒（彗星電泳法）    20T
DNA Ladder檢測試劑盒    20T
    50T
    100T
DNA Ladder 600    60T
DNA Ladder 1000    60T
DNA Ladder 2000    60T
DNA Ladder 3000    60T
DNA Ladder 5000    60T
DNA Ladder 22000    60T
DNA銀染試劑盒    20T
caspase-2活性檢測試劑盒
（分光光度法）    20T
    50T
    100T
caspase-3活性檢測試劑盒
（分光光度法）    20T
    50T
    100T
caspase-6活性檢測試劑盒
（分光光度法）    20T
    50T
    100T
caspase-8活性檢測試劑盒
（分光光度法）    20T
    50T
    100T
caspase-9活性檢測試劑盒
（分光光度法）    20T
    50T
    100T
細胞周期檢測試劑盒
（微板比色法）    50T
    100T
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
（微板比色法）    500T
    1000T
CCK-8細胞活力檢測試劑盒
（微板比色法）    100T
    500T
    1000T
凋亡細胞富集試劑盒    20T
Hoechst33342/PI雙染試劑盒    100T
DN斷化
檢測    細胞凋亡時主要的生化特征是其染色質(zhì)發(fā)生濃縮, 染色質(zhì)DNA在核小體單位之間的連接處斷裂, 形成50~300kbp長, 或180~200bp整數(shù)倍的寡核苷酸片段, 在凝膠電泳上表現(xiàn)為梯形電泳圖譜（DNA ladder）。細胞經(jīng)處理后，采用常規(guī)方法分離提純DNA，進行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色，在凋亡細胞群中可觀察到典型的DNA ladder。如果細胞量很少，還可在分離提純DNA后，用32P-ATP和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）使DNA標(biāo)記，然后進行電泳和放射自顯影，觀察凋亡細胞中DNA ladder的形成。
    
    
Caspase家族活性的檢測    Caspase家族在介導(dǎo)細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用。在正常狀態(tài)下， Caspase家族都以無活性的酶原(30～50kD)形式表達，當(dāng)細胞發(fā)生凋亡時Caspase可以被蛋白酶裂解，大亞基和小亞基形成活化的Caspase 。一些Caspase活化后可以次序激活其他Caspase形成Caspase級聯(lián)反應(yīng)，促發(fā)細胞凋亡。在目前已知的14種Caspase中，Caspase-3、8和9與凋亡的關(guān)系zui為密切，在細胞凋亡中起執(zhí)行凋亡的作用。將Caspase序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團，當(dāng)該底物被特定的caspase剪切后，發(fā)色基團即游離出來，可通過酶標(biāo)儀或分光光度計（λ=405nm 或400nm）測定其吸光值，考察caspase的活化程度。
        
    
細胞周期及細胞增殖檢測    細胞壞死和凋亡是兩種截然不同的細胞學(xué)現(xiàn)象，二者發(fā)生的過程在形態(tài)學(xué)上有很大的區(qū)別。在細胞壞死時，細胞膜發(fā)生滲漏，細胞內(nèi)容物包括細胞器及染色質(zhì)釋放到胞外。而在細胞凋亡過程，起始階段，染色質(zhì)固縮、分離并沿核膜分布，細胞質(zhì)亦發(fā)生固縮，但細胞膜依然完整未失去選擇透性；在凋亡后期，核染色質(zhì)斷裂為大小不等的片斷，與某些細胞器如線粒體一起聚集，為反折的細胞膜包圍，后逐漸分離，形成凋亡小體。