小鼠糖化血紅蛋白（GHb）Elisa試劑盒吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體，適用多種標(biāo)本類(lèi)型并節(jié)約成本。其高效、靈敏、特異的抗體與高效、靈敏、特異的抗體使實(shí)驗(yàn)曲線(xiàn)更*。是一款可以讓您放心選購(gòu)的ELISA試劑盒產(chǎn)品。

產(chǎn)品相關(guān)參數(shù)
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
產(chǎn)品有效期：zui長(zhǎng)6個(gè)月，儲(chǔ)存條件2-8℃
產(chǎn)品特異性：小鼠糖化血紅蛋白(GHb)Elisa試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)設(shè)備：酶標(biāo)儀， 37℃恒溫箱，自動(dòng)洗板機(jī)，可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭，蒸餾水，干凈的試管，容量瓶等。
小鼠糖化血紅蛋白(GHb)Elisa試劑盒1.產(chǎn)品具有高效性、靈敏性、特異性等特點(diǎn)
2.產(chǎn)品的穩(wěn)定性和可靠性，檢測(cè)種屬有人，動(dòng)物，植物，金標(biāo)ELISA試劑盒等
3.產(chǎn)品吸附均勻，吸附性能好，空白值低，孔底透明度高
4.產(chǎn)品適用于 血清、血漿、體液、尿液等各種樣本
5.產(chǎn)品質(zhì)量保證，由于產(chǎn)品本身質(zhì)量問(wèn)題使實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想，可以換貨或退貨
6. 公司與順豐快遞密切合作，保證了產(chǎn)品時(shí)效性與安全性
7.公司提供7*24小時(shí)，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到的任何問(wèn)題我司高級(jí)技術(shù)人員會(huì)為你提供技術(shù)指導(dǎo)

【適用范圍】： 
1．適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型； 
2．可檢測(cè)動(dòng)物類(lèi)型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞、蝦、魚(yú)等 
3．可檢測(cè)指標(biāo)齊全：白介素，干擾素，血管緊張素，肺炎衣原體，趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶、炎癥因子、血管生成素 等等 指標(biāo) 

產(chǎn)品圖片
 

聲明 
1. 限于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平，尚不能對(duì)所有原料進(jìn)行全面的鑒定分析，本產(chǎn)品可能存
在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。
2. zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)，請(qǐng)
務(wù)必準(zhǔn)備充足的待測(cè)樣品。
3. 只有全部使用試劑盒內(nèi)的試劑才能保證檢測(cè)效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)
格遵守本實(shí)驗(yàn)說(shuō)明才會(huì)得到*的檢測(cè)結(jié)果。
4. 有效期：6 個(gè)月。
【實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備】：
1. ELISA試劑盒及待測(cè)樣本
2. 酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片) 
3. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭
4. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水 
5. 吸水紙
 
【標(biāo)本要求】：
1.血清： 
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 
2.血漿： 
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。 
3.尿液： 
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。 
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清： 
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。 
5.培養(yǎng)細(xì)胞: 
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 
6.組織標(biāo)本: 
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。 
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融 
8.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。 

【小小鼠糖化血紅蛋白(GHb)Elisa試劑盒操作步驟】：
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液：將30倍（48T 的20 倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
 
【計(jì)算結(jié)果】：
      以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。 
 
【操作事項(xiàng)】：
1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.  加樣：加樣或加試劑時(shí)，請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間（包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品）控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請(qǐng)精確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置（如吸取檢測(cè)溶液A時(shí)，一次不要小于10μl），以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀(guān)察反應(yīng)孔的顏色變化（比如，每隔10分鐘），如顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請(qǐng)避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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DN斷化
檢測(cè)    細(xì)胞凋亡時(shí)主要的生化特征是其染色質(zhì)發(fā)生濃縮, 染色質(zhì)DNA在核小體單位之間的連接處斷裂, 形成50~300kbp長(zhǎng), 或180~200bp整數(shù)倍的寡核苷酸片段, 在凝膠電泳上表現(xiàn)為梯形電泳圖譜（DNA ladder）。細(xì)胞經(jīng)處理后，采用常規(guī)方法分離提純DNA，進(jìn)行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色，在凋亡細(xì)胞群中可觀(guān)察到典型的DNA ladder。如果細(xì)胞量很少，還可在分離提純DNA后，用32P-ATP和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）使DNA標(biāo)記，然后進(jìn)行電泳和放射自顯影，觀(guān)察凋亡細(xì)胞中DNA ladder的形成。
    
    
Caspase家族活性的檢測(cè)    Caspase家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過(guò)程中起著非常重要的作用。在正常狀態(tài)下， Caspase家族都以無(wú)活性的酶原(30～50kD)形式表達(dá)，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)Caspase可以被蛋白酶裂解，大亞基和小亞基形成活化的Caspase 。一些Caspase活化后可以次序激活其他Caspase形成Caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)，促發(fā)細(xì)胞凋亡。在目前已知的14種Caspase中，Caspase-3、8和9與凋亡的關(guān)系z(mì)ui為密切，在細(xì)胞凋亡中起執(zhí)行凋亡的作用。將Caspase序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)，當(dāng)該底物被特定的caspase剪切后，發(fā)色基團(tuán)即游離出來(lái)，可通過(guò)酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)（λ=405nm 或400nm）測(cè)定其吸光值，考察caspase的活化程度。
        
    
細(xì)胞周期及細(xì)胞增殖檢測(cè)    細(xì)胞壞死和凋亡是兩種截然不同的細(xì)胞學(xué)現(xiàn)象，二者發(fā)生的過(guò)程在形態(tài)學(xué)上有很大的區(qū)別。在細(xì)胞壞死時(shí)，細(xì)胞膜發(fā)生滲漏，細(xì)胞內(nèi)容物包括細(xì)胞器及染色質(zhì)釋放到胞外。而在細(xì)胞凋亡過(guò)程，起始階段，染色質(zhì)固縮、分離并沿核膜分布，細(xì)胞質(zhì)亦發(fā)生固縮，但細(xì)胞膜依然完整未失去選擇透性；在凋亡后期，核染色質(zhì)斷裂為大小不等的片斷，與某些細(xì)胞器如線(xiàn)粒體一起聚集，為反折的細(xì)胞膜包圍，后逐漸分離，形成凋亡小體。