一管式反轉(zhuǎn)錄試劑盒（RT MIX）是一管式反轉(zhuǎn)錄預(yù)混 Mix，內(nèi)含反轉(zhuǎn)錄*鏈合成所需的所有試劑
（MMLV、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反應(yīng) Buffer 等），
用戶只需加入模板 RNA 和 RNase-Free 水即可進(jìn)行反應(yīng)。

一管式反轉(zhuǎn)錄試劑盒（RT MIX）特點(diǎn)如下：
1. cDNA 的合成更加方便，用戶只需準(zhǔn)備模板和水即可進(jìn)行反應(yīng)。
2. 快捷，操作步驟已經(jīng)zui大限度地簡(jiǎn)化，能減少污染，降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 效率高，特殊優(yōu)化的 oligo dT 和 N6 隨機(jī)引物配比，反轉(zhuǎn)錄效率高。
4. 速度快，只需 42℃，20 分鐘即可完成 cDNA *鏈的合成。
5. 能夠用于 GC 含量高，二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的 RNA 模板，合成 cDNA 段長(zhǎng)度可達(dá) 12
kb。
6. 兼容性好，合成的 cDNA 可直接用于熒光定量 PCR 反應(yīng)，靈敏度高、穩(wěn)定性好
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 10 次包裝 50 次包裝
2×RT MasterMix 170403 0.1 mL 0.5 mL
RNase-Free 水 80403 1 mL 1 mL
使用手冊(cè) 1 份
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存, 有效期一年。
自備試劑 RNA 模板。
使用方法 1. 解凍后顛倒輕彈混勻各組分，以 20 uL 體系為例，按下表加入（2×RT Master Mix
很粘稠，取用前請(qǐng)短暫離心，并避免吸頭外壁沾附損失）：
2×RT MasterMix 10 uL
Total RNA/mRNA 模板(自備) 50 ng-2 ug/5-200ng
補(bǔ) RNase-Free 水到 20 uL
注意：對(duì)亍二級(jí)結(jié)構(gòu)很復(fù)雜的 RNA 模板，推薦使用變性步驟，即在操作步驟之
前，將模板 RNA 在 65℃孵育 5 分鐘后迅速轉(zhuǎn)移到冰上，再進(jìn)行下一步操作。
2. 輕輕混勻，42℃孵育 20 分鐘進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
注意：對(duì)亍二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜或者 GC 含量高的模板，可以提高溫度至 50℃，以增
強(qiáng)反轉(zhuǎn)錄效率。
3. 85℃加熱 5 秒鐘滅活反轉(zhuǎn)錄酶置冰上備用（更長(zhǎng)時(shí)間保存請(qǐng)置于-20℃）。
注意事項(xiàng) 1. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)注意避免RNase污染，防止RNA降解或?qū)嶒?yàn)中的交叉污染。
2. 使用之前請(qǐng)*溶解并充分混勻，以防因鹽離子濃度丌均影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3. 使用后應(yīng)盡快放回-20℃，避免反復(fù)凍融。
4. RNA模板的完整性對(duì)cDNA合成效率起著決定性作用，因此請(qǐng)選擇可靠的RNA提
取/純化方法。
5. 如果擴(kuò)增段較長(zhǎng)或者RNA結(jié)構(gòu)復(fù)雜，為了加強(qiáng)轉(zhuǎn)錄效果，可以將RNA單獨(dú)置于
65-70℃加熱 5-10分鐘后再加入體系。
6. 操作人員請(qǐng)帶口罩和一次性手套，并經(jīng)常更換手套。
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 cDNA *鏈合成試劑盒(CAT#:60906)