詳細(xì)介紹
胎盤堿性磷酸酶檢測試劑盒(Placental Alkaline Phosphatase Assay Kit)是一種用于快速、便捷地檢測血清、血漿、尿液或細(xì)胞或組織樣品的裂解或勻漿產(chǎn)物的上清液等樣品中內(nèi)源性的胎盤堿性磷酸酶活性的試劑盒。
堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos),也稱堿性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1),可以在堿性條件下,催化磷酸酯鍵的水解。哺乳動(dòng)物中,肝臟、膽管、腎臟、骨頭和胎盤中的堿性磷酸酶活性比較高。常見的堿性磷酸酶包括腸道堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非組織特異性堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-
nonspecific isozyme, ALPL)和胎盤堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也稱placental alkaline phosphatase, PLAP)。常見的小牛腸堿性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, CIAP/CIP)被廣泛用于二抗等的標(biāo)記zui終用于蛋白和核酸等的檢測,也常用于DNA或RNA 5'和3'末端的去磷酸化(去單磷酸化),特別是質(zhì)粒的5'末端去磷酸化以避免質(zhì)粒自連等。
胎盤堿性磷酸酶是一種膜結(jié)合的糖基化的堿性磷酸酶,具有較高的熱穩(wěn)定性,主要分布在胎盤。血液中胎盤堿性磷酸酶的升高被認(rèn)為是腫瘤的特征性指標(biāo),特別是精原細(xì)胞癌和卵巢癌的重要分子標(biāo)記。本試劑盒可以檢測細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清、尿液或純化的酶樣品等中的胎盤堿性磷酸酶活性。
胎盤堿性磷酸酶檢測試劑盒一方面利用了胎盤堿性磷酸酶的熱穩(wěn)定性,加熱處理后去除了絕大部分其它堿性磷酸酶,另一方面,優(yōu)化了胎盤堿性磷酸酶的檢測條件,使檢測體系更適合于胎盤堿性磷酸酶的檢測。
Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一種常用的磷酸酶顯色底物,在堿性條件下,可在胎盤堿性磷酸酶作用下生成
para-nitrophenol。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在堿性條件下,呈黃色產(chǎn)物,可以在400-415nm檢測吸光度。產(chǎn)物黃色越深, 說明胎盤堿性磷酸酶檢活性越高,反之則酶活性越低。據(jù)此通過比色分析就可以計(jì)算出胎盤堿性磷酸酶活性水平。
包括標(biāo)準(zhǔn)品和空白對(duì)照,本試劑盒共可進(jìn)行100個(gè)樣品的檢測。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
P0329-1 | 檢測緩沖液 | 15ml |
P0329-2 | 顯色底物 | 2管 |
P0329-3 | p-nitrophenol溶液(10mM) | 0.1ml |
P0329-4 | 反應(yīng)終止液 | 12ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
-20℃保存,一年有效。其中顯色底物和p-nitrophenol溶液需避光保存。
注意事項(xiàng):
如果希望進(jìn)行酶活性的定量,進(jìn)行酶反應(yīng)時(shí)必須注意精確計(jì)時(shí)。此時(shí)推薦采用孵育30分鐘等較長的時(shí)間,以減小操作過程中的時(shí)間誤差。同時(shí)如果樣品中酶活性較高,則可以預(yù)先適當(dāng)稀釋樣品。
樣品溶液中須避免出現(xiàn)EDTA、氟離子、檸檬酸鹽等堿性磷酸酶的抑制劑。
檢測緩沖液和p-nitrophenol溶液對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。反應(yīng)終止液有腐蝕性,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或腐蝕其他物品。
僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。