CuZn/Mn-SOD活性檢測(cè)試劑盒（WST-8法）（Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8）是一種基于WST-8的顯色反應(yīng)，通過(guò)比色來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或其它樣品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或總SOD活性的試劑盒。

CuZn/Mn-SOD活性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)(Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8)是一種基于WST-8的顯色反應(yīng)，通過(guò)比色來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或其它樣品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或總SOD活性的試劑盒。
      超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase,SOD)能催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用，生成過(guò)氧化氫(H2O2)和氧氣(O2)，是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶。
      目前有多種SOD活性測(cè)定法，其中NBT(氮藍(lán)四唑)法由于使用方便而被廣泛使用。但NBT法產(chǎn)生的甲臜染料水溶性差，易和被還原的黃嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率達(dá)不到100%等，從而使檢測(cè)的靈敏度和精確度受到影響；細(xì)胞色素C法也是一種常用來(lái)檢測(cè)SOD活性的方法，但細(xì)胞色素C其氧化活性高，易受樣品中的還原劑干擾，另外該方法需要連續(xù)測(cè)定吸光度值，對(duì)于SOD的檢測(cè)靈敏度比較低，并且不太適合大批量樣本的檢測(cè)。
      目前測(cè)定SOD比較先進(jìn)的方法包括WST-1法和WST-8法，其中WST-8法比WST-1法更加穩(wěn)定、靈敏度更高。本試劑盒采用了目前測(cè)定SOD方法中穩(wěn)定性更好、靈敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理參考下圖，WST-8可以和黃嘌呤氧化酶催化產(chǎn)生的超氧化物陰離子反應(yīng)產(chǎn)生水溶性的甲臜染料(formazan dye)，該反應(yīng)步驟可以被SOD所抑制。通過(guò)對(duì)WST-8產(chǎn)物的比色分析即可計(jì)算SOD的酶活力。
                
      基于黃嘌呤氧化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系和WST-8的SOD酶活力檢測(cè)原理圖。XO：xanthine oxidase。
      WST-8的反應(yīng)產(chǎn)物是穩(wěn)定的水溶性產(chǎn)物，可以通過(guò)單個(gè)時(shí)間點(diǎn)的吸光度檢測(cè)來(lái)測(cè)定SOD活力，適合高通量篩選研究。同時(shí)WST-8法測(cè)定SOD酶活力時(shí)，zui大抑制百分率可以接近100%，并且可以不受一些常見的干擾因素的干擾，使檢測(cè)效果比其它的一些常見方法顯著改善。 
      CuZn/Mn-SOD活性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)的檢測(cè)不受樣品中過(guò)氧化氫的干擾。很多細(xì)胞和組織樣品中含有內(nèi)源性的過(guò)氧化氫，會(huì)干擾SOD的檢測(cè)。本試劑盒通過(guò)添加適量過(guò)氧化氫酶等特殊方法，能有效去除常規(guī)樣品中過(guò)氧化氫的干擾。例如，對(duì)于SOD標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)，標(biāo)準(zhǔn)品中添加高達(dá)0.1mM的過(guò)氧化氫時(shí)，對(duì)于檢測(cè)結(jié)果仍無(wú)顯著影響。
      哺乳動(dòng)物編碼3種SOD。在大部分組織中，含量zui高的是定位在細(xì)胞漿中的Cu/Zn-SOD。Mn-SOD主要表達(dá)在線粒體中，并且Mn-SOD是可以被誘導(dǎo)表達(dá)的。Mn-SOD在某些情況下也可以定位在細(xì)胞漿中。有些組織或體液中會(huì)含有第三種SOD，extracellular SOD，簡(jiǎn)稱EC-SOD。EC-SOD也是一種Cu/Zn-SOD，和編碼細(xì)胞漿Cu/Zn-SOD的基因相似性很高，但有所不同。綜上所述，細(xì)胞或組織內(nèi)共有兩類SOD，即銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)。這兩種SOD酶活性的總量就是總SOD的酶活性。當(dāng)用Cu/Zn-SOD的抑制劑抑制其酶活性時(shí)測(cè)定得到的就是Mn-SOD的酶活性。如果此時(shí)同時(shí)測(cè)定總的SOD酶活性，就可以計(jì)算出Cu/Zn-SOD的酶活性。
      KCN或NaCN可抑制CuZn-SOD酶活性，也被大量用于測(cè)定Mn-SOD的酶活性。 但KCN或NaCN都具有，并且對(duì)Cu/Zn-SOD的抑制百分比達(dá)不到很接近100%。
      本試劑盒采用了一種無(wú)毒的兩步雙重抑制Cu/Zn-SOD的方法，在避免使用有品的情況下同時(shí)確保了對(duì)于Cu/Zn-SOD的抑制百分比達(dá)到高度接近100%，即對(duì)于Cu/Zn-SOD的抑制*優(yōu)于KCN或NaCN。使對(duì)于Cu/Zn-SOD或Mn-SOD酶活力的測(cè)定更加安全和準(zhǔn)確。
      CuZn/Mn-SOD活性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)可以檢測(cè)細(xì)胞或組織勻漿液上清、全血、紅細(xì)胞抽提物、血清等生物樣品中的SOD活性。一個(gè)試劑盒共可以進(jìn)行100次檢測(cè)。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)    產(chǎn)品名稱    包裝
S0103-1    SOD檢測(cè)緩沖液    70ml
S0103-2    WST-8    800μl
S0103-3    酶溶液    100μl
S0103-4    反應(yīng)啟動(dòng)液(40X)    60μl
S0103-5    Cu/Zn-SOD抑制劑A    500μl
S0103-6    Cu/Zn-SOD抑制劑B    500μl
—    說(shuō)明書    1份
保存條件：
      -20℃保存，半年有效。S0103-2 WST-8溶液需避光保存。
注意事項(xiàng)：
      待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
      細(xì)胞或組織等樣品制備時(shí)不能采用含有Triton X-100等去垢劑的溶液，否則會(huì)干擾本試劑盒的檢測(cè)。
      抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色，如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3，就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。       Cu/Zn-SOD抑制劑A對(duì)人體有刺激性，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意適當(dāng)防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
     CuZn/Mn-SOD活性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。