詳細介紹
總谷胱甘肽過氧化物酶檢測試劑盒(GSH and GSSG Assay Kit)是一種簡單易行的可以分別檢測出GSH(還原型谷胱甘肽)和GSSG(氧化型谷胱甘肽)含量的檢測試劑盒。
通過谷胱甘肽還原酶把GSSG還原成GSH,而GSH可以和生色底物DTNB反應產(chǎn)生黃色的TNB和GSSG。適當配制反應體系,前后兩個反應合并起來后,總谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相當于一個顏色產(chǎn)生的限速因素,總谷胱甘肽的量就決定了黃色的TNB形成量。從而通過測定A412就可以計算出總谷胱甘肽的量。用適當試劑先清除樣品中的GSH,然后利用上述反應原理就可以測定出GSSG的含量。用總谷胱甘肽(GSSG+GSH)的量扣除GSSG的含量,就可以計算出GSH的含量。
總谷胱甘肽過氧化物酶檢測試劑盒的具體反應原理如下:
兩個反應相合并:
還原型谷胱甘肽是絕大多數(shù)活細胞中巰基的主要來源,對于維護蛋白巰基適當?shù)难趸€原狀態(tài)有重要作用,并且是動物細胞中關(guān)鍵的抗氧化劑??偣入赘孰闹型ǔ?0-95%為還原型谷胱甘肽。
本試劑盒可以檢測動物組織、血漿、紅細胞、和培養(yǎng)細胞或其它適當樣品中GSH和GSSG的含量。
本試劑盒提供了蛋白去除試劑M,可以更加準確地測定出含有蛋白的樣品中的GSH和GSSG的量。
的檢測下限為0.5μM。一個試劑盒共可以進行100次檢測,可以測定100個樣品的總谷胱甘肽或GSSG的含量,或可以測定出50個樣品中GSH和GSSG的各自含量。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
S0053-1 總谷胱甘肽檢測緩沖液 60ml
S0053-2 谷胱甘肽還原酶 150μl
S0053-3 氧化型谷胱甘肽 (GSSG) 5mg
S0053-4 DTNB 4.5mg
S0053-5 蛋白去除試劑M 1g
S0053-6 NADPH 4mg
S0053-7 DMSO 1.5ml
S0053-8 GSH清除輔助液 0.8ml
S0053-9 GSH清除試劑 160μl
— 說明書 1份
保存條件:
-20℃保存,一年有效。GSSG配制成溶液后,需適當分裝,-20℃保存至少3個月有效。DTNB溶解于DMSO后,需適當分裝,-20℃保存至少3個月有效。蛋白去除試劑M配制成溶液后僅限當天使用。NADPH溶解后,適當分裝,-70℃保存。稀釋的GSH清除輔助液和GSH清除試劑溶液均須新鮮配制使用。
注意事項:
本試劑盒檢測時牽涉到氧化還原反應,所有氧化劑或還原劑都會干擾本試劑盒的測定。特別是DTT、巰基乙醇等含有巰基的試劑會嚴重干擾本試劑盒的測定,請盡量避免。
一定要嚴格控制反應時的溫度和反應時間,否則每次都需做標準曲線。
NADPH等試劑不太穩(wěn)定,要嚴格按照后續(xù)說明操作,謹防失活。
蛋白去除試劑M溶液必須新鮮配制并限當日使用。GSH清除試劑也須新鮮稀釋后使用。
蛋白去除試劑M較難溶解,可以通過劇烈vortex并適當加熱(不超過37℃)以促進溶解。
DMSO在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。