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關(guān)于操作康寧基質(zhì)膠的溫馨提示
康寧基質(zhì)膠為一種從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出的基底膜基質(zhì)，主要成分包含層粘連蛋白、IV型膠原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白，還包含生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。鑒于基質(zhì)膠的操作環(huán)境要求比較嚴(yán)格，為保證您的實(shí)驗(yàn)順利，特此對(duì)以下幾個(gè)方面進(jìn)行溫馨提示：
1.收貨時(shí)，首先確認(rèn)還有干冰，基質(zhì)膠成固態(tài)，液面水平，如有異常請(qǐng)及時(shí)拍照取證并聯(lián)系我們；
2.整個(gè)基質(zhì)膠只能分裝一次，在分裝前，要先放在4℃冰箱（最好先把基質(zhì)膠插在冰上，然后放入4℃冰箱）一段時(shí)間待之融化（切記不要放在冰箱門上或者是經(jīng)常要敞開口取放試劑的冰箱），且分裝用的槍頭、EP管等都要提前-20℃預(yù)冷（因?yàn)榛|(zhì)膠在10℃以上即會(huì)發(fā)生成膠凝固導(dǎo)致基質(zhì)膠報(bào)廢），整個(gè)分裝過程要在冰上進(jìn)行，且以后每次實(shí)驗(yàn)時(shí)拿出本次用量的已經(jīng)分裝好的基質(zhì)膠用，該次實(shí)驗(yàn)用不完的基質(zhì)膠要扔掉，不可以留作下次使用；
3.實(shí)驗(yàn)人員的手心不要接觸基質(zhì)膠，如：要手持裝有基質(zhì)膠的EP管的上方，防止體溫使基質(zhì)膠成膠凝固；
4.平?；|(zhì)膠的濃度是8-12mg/ml，高濃度的基質(zhì)膠的濃度是18-22mg/ml，具體濃度可通過貨號(hào)查詢；
5.以24孔板為例，做腫瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)時(shí)每孔加入基質(zhì)膠20-30ug（一般配成200-300ug/ml的工作濃度，然后每孔加入100ul即可）。此時(shí)，基質(zhì)膠是100ul即可）。此時(shí)，基質(zhì)膠是稀釋到很低的倍數(shù)（有的實(shí)驗(yàn)需要低至30倍稀釋，具體最適濃度需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化）。鋪膠后置于37℃提升箱放置1小時(shí)，取出后如果上層有液態(tài)提升基，需小心棄去上層的液態(tài)提升基即可使用（此時(shí)基質(zhì)膠沉在底部形成一小薄層）。