CD45RO(T細(xì)胞)鼠單克隆抗體

廣州健侖生物科技有限公司

CD45RO是CD45的一種異構(gòu)體，分子量為180kDa，表達(dá)于大部分正常外周T淋巴細(xì)胞、37％CD4陽(yáng)性淋巴細(xì)胞、80％胸腺細(xì)胞和絕大多數(shù)T細(xì)胞淋巴瘤、少數(shù)B細(xì)胞淋巴瘤、髓性白血病以及漿細(xì)胞腫瘤。

我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌、化妝品檢測(cè)、食品安全檢測(cè)等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國(guó)SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

歡迎咨詢

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【產(chǎn)品介紹】

細(xì)胞定位：細(xì)胞膜

克隆號(hào)：UCHL-1

同型：IgG2a/K

適用組織：石蠟/冰凍

陽(yáng)性對(duì)照：扁桃體

抗原修復(fù)：熱修復(fù)（EDTA）

抗體孵育時(shí)間：30-60min

CD45RO(T細(xì)胞)鼠單克隆抗體

二、細(xì)胞轉(zhuǎn)染
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備
① 將400ul去核酸酶水加入管中，震蕩10秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA質(zhì)量)來(lái)轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無(wú)血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的MyoD或者EGFP的DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。
3. 將混合液在室溫放置10―15分鐘。
4. 吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，用PBS或者無(wú)血清培養(yǎng)基清洗一次。
5. 加入混合液，將細(xì)胞放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一個(gè)小時(shí)。
6. 到時(shí)后，根據(jù)細(xì)胞種類決定是否移除混合液，之后加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24－48小時(shí)。
三、第二次細(xì)胞傳代
1. 在轉(zhuǎn)染后24小時(shí)，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果并記錄綠色熒光蛋白表達(dá)情況。
2. 再次進(jìn)行細(xì)胞傳代，按照免疫染色合適的密度0.8X105個(gè)細(xì)胞/35mm培養(yǎng)皿將細(xì)胞重新轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中。
3. 在正常條件下培養(yǎng)24小時(shí)后按照染色要求條件固定。
發(fā)生細(xì)胞凋亡時(shí)，內(nèi)源性核酸酶被激活，染色體DNA鏈在核小體之間被切割，形成180～200個(gè)堿基或其整數(shù)倍的DNA的片段，將這些DNA的片段抽提出來(lái)進(jìn)行電泳，可得到DNA梯狀條帶（DNA ladder）。
一、材料與試劑
凋亡細(xì)胞；
蛋白酶K（500μg/ml）
8mol/L 醋酸鉀
白細(xì)胞裂解液：pH8.0，10mmol/L Tris-HCl，10mmol/L NaCl，10mmol/L EDTA，1% SDS。
抗原抗體
無(wú)水乙醇，70%乙醇；

CD45RO(T細(xì)胞)鼠單克隆抗體

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Second, cell transfection
1. Transfection reagent preparation
① 400ul nuclease water added to the tube, shock 10 seconds, dissolved fat.
② After the shock on the reagent stored at -20 degrees Celsius, need to be shocked before use.
2. Select the appropriate mixing ratio (1: 1-1: 2 / liposome volume: DNA quality) to transfected cells. Add a suitable volume of serum-free medium to one transfer tube. Add appropriate amount of MyoD or EGFP DNA, shake and add appropriate volume of transfection reagent, shake again.
3. Place the mixture at room temperature for 10-15 minutes.
4. Aspirate the medium from the plate and wash once with PBS or serum-free medium.
5. Add the mixture and put the cells back into the incubator and incubate for one hour.
6. By the time, depending on cell type to decide whether to remove the mixture, then add complete medium for 24-48 hours.
Third, the second cell passage
1. 24 hours after transfection, observe the experimental results and record the expression of green fluorescent protein.
2. Repeat the passage of cells and reintroduce the cells into Petri dishes according to the appropriate immunostaining density of 0.8 × 10 5 cells / 35 mm dish.
3. Under normal conditions for 24 hours after dyeing in accordance with the requirements of fixed conditions.
In the event of apoptosis, the endogenous nuclease is activated and the chromosomal DNA strand is cleaved between nucleosomes to form DNA fragments of 180 to 200 bases or integer multiples thereof. The DNA fragments are extracted After electrophoresis, a DNA ladder can be obtained.
First, materials and reagents
Apoptotic cells
Proteinase K (500 μg / ml)
8mol / L potassium acetate
Leukocyte lysate: pH 8.0, 10 mmol / L Tris-HCl, 10 mmol / L NaCl, 10 mmol / L EDTA, 1% SDS.
Antigen Antibody
Anhydrous ethanol, 70% ethanol;