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參考價(jià) | ¥8775 |
- 70202ES 型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
4 T | 8775元 | 99 件 可售 |
訪問次數(shù):219更新時(shí)間:2024-02-15 20:27:38
- 聯(lián)系人:
- 曹女士
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- 地址:
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 兩周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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產(chǎn)品簡介
Nuclear Yeast Two-Hybrid Library Construction Kit是一款用于構(gòu)建真核生物的全長核蛋白酵母雙雜交文庫的試劑盒,本試劑盒含有三個(gè)改造的PGADT7-S序列載體,分別命名為PGADT7-S1、PGADT7-S2、PGADT7-S3, 三個(gè)載體含有不用的讀碼框閱讀方式,可以方便合成一份相同的雙鏈cDNA構(gòu)建三框文庫。且改造的PGADT7-S序列載體多克隆上游含有NLS信號(hào)序列,可以把文庫全部轉(zhuǎn)錄本基因定位到核內(nèi)。本產(chǎn)品適用于起始模板為100 ng-100 μg不同來源真核生物總RNA樣本。經(jīng)過mRNA分離、單鏈cDNA合成、雙鏈cDNA合成、雙鏈cDNA分級(jí)純化、小量連接轉(zhuǎn)化確定分級(jí)取舍、大量連接轉(zhuǎn)化。
操作流程
圖1 核蛋白酵母雙雜交文庫構(gòu)建試劑盒流程原理圖
注意事項(xiàng)
關(guān)于操作
本產(chǎn)品僅作科研用途。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
請(qǐng)于使用前將試劑盒各組分置于室溫解凍。解凍后上下顛倒數(shù)次充分混勻,短暫離心后置于冰上待用。
推薦在帶熱蓋的PCR儀中進(jìn)行各步驟反應(yīng),使用前應(yīng)預(yù)熱PCR儀至反應(yīng)溫度附近。
請(qǐng)使用無RNase污染的耗材,并對(duì)實(shí)驗(yàn)區(qū)域定期進(jìn)行清理,推薦使用固相RNA清除劑(翌圣貨號(hào): 10609ES)去除RNA酶污染。
PCR產(chǎn)物因操作不當(dāng)極容易產(chǎn)生氣溶膠污染,進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。推薦將PCR反應(yīng)體系配制區(qū)和PCR產(chǎn)物純化檢測(cè)區(qū)進(jìn)行強(qiáng)制性的物理隔離;配備文庫構(gòu)建專用移液器等設(shè)備;定時(shí)對(duì)各實(shí)驗(yàn)區(qū)域進(jìn)行清潔(固相RNA清除劑(翌圣貨號(hào): 10609ES)),以保證實(shí)驗(yàn)環(huán)境的潔凈度。
應(yīng)用范圍
本產(chǎn)品僅作科研用途!
本試劑盒適用于起始模板量為100 ng-75 μg(體積≤100 μL)的高質(zhì)量動(dòng)物、植物和真菌等真核生物的總RNA。如初始RNA濃度偏低,體積超過100 μL,可使用Hieff NGS® RNA Cleaner磁珠進(jìn)行濃縮。 RNA需通過Agilent 2100 Bioanalyzer RNA 6000 Nano/Pico芯片檢測(cè),RIN值要求>7,以保證mRNA有完整的poly(A)尾結(jié)構(gòu)。
本試劑盒的mRNA分離模塊使用的是oligo (dT)磁珠,只有帶poly(A)尾的mRNA才能被提?。黄渌痪遬oly(A)尾的RNA,如非編碼RNA、無poly(A)尾的mRNA等不能適用本試劑盒。此外,F(xiàn)FPE樣本中的mRNA降解嚴(yán)重,通常無完整的poly(A)尾結(jié)構(gòu),故亦無法使用本試劑盒進(jìn)行建庫。