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41209ES04乳液外泌體快速抽提試劑盒Plus
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 41209ES04 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):303更新時間:2022-01-28 14:08:07

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 4T
貨號 41209ES04 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)
Exosome(外泌體)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質雙分子層結構,存在于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中。Exosome攜帶有多種蛋白質、脂類、DNA和RNA等重要信息,不僅在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標志物。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Milk)

乳液外泌體快速抽提試劑盒Plus

41209ES04

4 T

955.00

41209ES20

20 T

4255.00

 

產(chǎn)品描述

 

Exosome(外泌體)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質雙分子層結構;存在于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中;Exosome攜帶有多種蛋白質、脂類、DNA和RNA等重要信息,不僅在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標志物。

本試劑盒采用*的分離技術,可以快速從乳液中獲得大量完整的外泌體顆粒,適用于下游的細胞共培養(yǎng)、電鏡分析、Western Blot、熒光定量(qPCR)和高通量測序等應用。

 

產(chǎn)品組分

 

編號

組分

產(chǎn)品編號/規(guī)格

41209ES04

41209ES20

41209-A

Buffer-A

10 mL

50 mL

41209-B

Buffer-B

10 mL

50 mL

41209-C

Buffer-C

10 mL

50 mL

41209-D

Buffer-D

20 mL

100 mL

41209-E

50 mL過濾柱

4個

20個

 

運輸和保存方法

 

室溫運輸,本試劑盒可于室溫穩(wěn)定保存24個月。

 

注意事項

 

1、產(chǎn)品只針對乳液樣本,不適用其它血清/血液或者是細胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提;如果需要進行細胞上清外泌體分離,請選用細胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒。

2、如果想要進一步純化外泌體,可以使用相應抗體包被的磁珠進行親和純化。

3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

4、本產(chǎn)品僅作科研用途!

 

操作方法

 

樣品預處理:

1、收集新鮮的樣品,置于冰上待用;若為凍存的樣品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解凍,待*融化后置于冰上待用。

2、取25 mL(單次樣品最佳提取量為50 mL)乳液樣品轉移至離心管中,4℃,10000×g離心20 min,轉移分層樣品中的中層乳清至新的離心管中。(離心后樣品分為三層,上層為脂質層,中層為乳清層,下層為蛋白層。脂質層應致密、穩(wěn)定,若脂質層松軟,不穩(wěn)定,且蛋白層沉淀較多,可重復此步驟。)

3,向乳清中加入Buffer-A,顛倒混勻離心管至呈現(xiàn)半透明狀,再加入Buffer-B,顛倒混勻后2℃至8℃靜置10min。(靜置結束后搖晃離心管,樣品應呈現(xiàn)白色固體和透明液體混合物,若樣品仍為乳白色或是未呈現(xiàn)混合狀,可以適當加入Buffer-A至液體透明。)

乳清體積

Buffer-A

Buffer-B

20 mL

2 mL

1.5 mL

40 mL

4 mL

3 mL

【注】:試劑用量可根據(jù)此表進行等比例換算。

4,將樣品于4℃,10000×g離心10 min,收集上清液轉移至50 mL過濾柱中,4℃,3000×g離心2min。

5,收集過濾后的上清液至新的離心管中,加入和Buffer-B等量的Buffer-C顛倒混勻。

外泌體分離:

1、向預處理后的樣品中,按照下表加入Exosome isolation solution (其他樣品量根據(jù)表中試劑用量進行等比例變換)。

預處理樣品量

Buffer-D

20 mL

5 mL

40 mL

10 mL

【注】:試劑用量可根據(jù)此表進行等比例換算。

2、蓋緊離心管蓋,渦旋振蕩1 min,放置于4℃冰箱靜置2 h。

3、取出裝有混合液的離心管,4℃,10,000×g離心60 min,棄上清(盡可能吸凈上清液),收集富含外泌體的沉淀。

4、吸取一定量體積的1×PBS溶液均勻吹打離心沉淀物,待其充分懸浮于PBS后,將懸液轉移至新的1.5 mL離心管中。

【注】加入1×PBS的量,建議根據(jù)預處理樣本的體積決定,預處理樣本體積:Exosome Buffer體積=40:1。

5、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃,12,000×g離心5 min,棄沉淀,保留上清液,該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。

【注】此時如果依然可以看到明顯的沉淀,建議重復步驟5,多次離心至無明顯沉淀。

6)外泌體的保存:純化后的外泌體可于4℃保存3天,分裝后于-80℃ 長期保存,避免反復凍融。

外泌體除菌(可選):

獲得的外泌體后期需要與細胞共培養(yǎng),可以使用0.22 μm的濾器進行過濾除菌。初次嘗試時,外泌體濃度在10-100 μg/mL內做梯度摸索,選擇一個較為合適的條件。

 

HB220107



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