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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·12年
線粒體紅色熒光探針
| 參考價: | ￥ 425 |
| 訂貨量: | 1 臺 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：2829更新時間：2023-02-23 13:54:32
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50ug |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 40741ES50 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
MitoTracker® Red CMXRos 線粒體紅色熒光探針 | 40741ES50 | 50 µg | 425.00 |
產(chǎn)品描述
MitoTracker® Red CMXRos線粒體紅色熒光探針是一種細胞滲透型的X-rosamine衍生物，包含標記線粒體的弱巰基反應性的氯甲基官能團。本品是一種氧化型的紅色熒光染料（Ex=579 nm，Em=599 nm），只需簡單孵育細胞，即可被動運輸穿過細胞膜并直接聚集在活性線粒體上。一旦線粒體被染色后，還能根據(jù)后續(xù)實驗的需求進行固定（醛類固定劑如甲醛）和透化（醛類去污劑如Triton X-100），探針依然維持在細胞內(nèi)。本品適合雙標實驗，因其紅色熒光與其他的綠色熒光探針具有良好的分辨率。
雖然傳統(tǒng)的線粒體熒光探針如TMR和羅丹明123，也能很容易的聚集在功能線粒體上，但是一旦線粒體膜電位喪失即會被洗掉，從而在一些需要細胞進行醛類固定或者包含線粒體能量狀態(tài)影響因子的實驗中，使其應用大受限制。
產(chǎn)品性質(zhì)
CAS號（CAS NO.） | 167095-09-2 |
分子式（Formula） | C32H32Cl2N2O |
分子量（Molecular weight） | 531.52 |
外觀（Appearance） | 紫色固體 |
激發(fā)波長（Ex） | 579 nm |
發(fā)射波長（Em） | 599 nm |
結(jié)構(gòu)式（Structure） |
|
運輸和保存方法
室溫運輸；-20℃避光干燥保存，有效期1年。
使用方法
1. 儲存液的配制
本品是以粉末形式提供，使用前需將本品回溫至室溫。
之后使用細胞培養(yǎng)級別的無水DMSO（如Yeasen，貨號：60313ES60）將其充分溶解至終濃度1 mM。
本品M. Wt.= 531.52 g/mol，換算下來，50 µg粉末只需加入94 µL DMSO即可得到1 mM儲存液。
可根據(jù)單次的使用量將儲存液分裝后放到-20℃避光，避免反復凍融。
2. 工作液的配制
根據(jù)不同的實驗目的使用不同的探針濃度，以下的起始操作條件僅作參考，可根據(jù)細胞類型和其他的相關(guān)因素如細胞或組織的透化等進行適當調(diào)整。
用適當?shù)木彌_液或者細胞培養(yǎng)基稀釋1 mM儲存液至工作液濃度。一般推薦使用濃度為25-500 nM。對于后續(xù)需要做固定或透化的樣本，推薦工作濃度為100-500 nM，為了降低過度加載導致的潛在偽影和線粒體毒性，在不影響實驗結(jié)果的前提下應盡可能低濃度染色。另外，濃度過高也可能對其他細胞結(jié)構(gòu)進行染色。
3. 染色及檢測
1）貼壁細胞的染色
培養(yǎng)皿/板內(nèi)加入適量的培養(yǎng)基覆蓋蓋玻片進行爬片培養(yǎng)。當細胞長至所需豐度，吸除培養(yǎng)液，加入37℃預熱的MitoTracker® Red CMXRos染色工作液。在所使用細胞正常培養(yǎng)條件下孵育15-45 min（最佳孵育時間需優(yōu)化）。染色結(jié)束后，使用新鮮培養(yǎng)液或緩沖液替換上述染色液，即可將其置于熒光顯微鏡下觀察或熒光酶標儀下讀數(shù)。或者進行后續(xù)的固定和透化步驟，見步驟4。
2）懸浮細胞的染色
離心收集細胞，吸除上清，利用37℃預熱的MitoTracker® Red CMXRos染色工作液輕輕重懸細胞。在所使用細胞正常培養(yǎng)條件下孵育15-45 min（最佳孵育時間需優(yōu)化）。染色結(jié)束后，離心收集細胞，利用37℃預熱的新鮮培養(yǎng)液或緩沖液重懸細胞，被染色的細胞可用流式細胞儀、熒光酶標儀、熒光顯微鏡進行分析。
如果需要蓋玻片上固定化的細胞，那么可在鋪片前先用多聚賴氨酸（poly-D-lysine）包被載玻片或蓋玻片。
或者進行后續(xù)的固定和透化步驟，見步驟4。
4. 固定和透化
1）染色結(jié)束后，利用培養(yǎng)液或緩沖液清洗細胞；
2）小心吸走清洗液。換用新鮮配制且預熱的含2-4%甲醛的緩沖液或培養(yǎng)液進行細胞固定。經(jīng)驗證，本染料MitoTracker® Red CMXRos由含3.7%甲醛的*培養(yǎng)液于37℃孵育內(nèi)皮細胞15 min能起到良好的固定效果。
3）清洗細胞：吸除固定液，用適當緩沖液沖洗細胞數(shù)次。
4）細胞透化（可選）：
像ICC等實驗需要細胞要做透化，則可將已固定的細胞直接加入含有去污劑如Triton X-100的緩沖液中孵育。透化結(jié)束后，用緩沖液清洗細胞即可進行后續(xù)ICC實驗。經(jīng)檢測，利用含0.2% Triton X-100的PBS孵育內(nèi)皮細胞10 min可以達到良好的透化效果。
另外，還可利用預冷的丙酮透化5 min，之后用PBS清洗細胞。經(jīng)驗證，即使后繼沒有進一步的抗體標記，丙酮透化處理也可降低背景信號。
注意事項
1）DMSO有毒，使用時請小心操作。
2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3）本產(chǎn)品僅作科研用途！
HB211230
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