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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·12年
20513ES03生物素分子純化預(yù)裝柱，1ML
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 20513ES03 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：969更新時(shí)間：2022-02-10 11:56:54
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | 20513ES03 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 1ML
生物素分子純化預(yù)裝柱，1ML
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 價(jià)格（元） |
BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 1ML 生物素分子純化預(yù)裝柱，1ML | 20513ES03 | 1 mL | 4℃ | 428.00 |
20513ES08 | 5×1 mL | 4℃ | 1328.00 |
產(chǎn)品描述
Streptavidin Agarose Resin 6FF是一種生物素或生物素化的蛋白、抗體等物質(zhì)的純化樹(shù)脂，其作用原理是基于鏈霉親和素與生物之間的相互作用，將鏈霉親和素高度交聯(lián)于6%瓊脂糖上，*的制備工藝使其具有更高的物理化學(xué)特性，可以耐受更高的壓力，在相對(duì)較高的流速下，實(shí)現(xiàn)對(duì)目的蛋白的純化，更適于工業(yè)大規(guī)模蛋白的純化。
由于鏈霉親和素與生物之間的親和力很強(qiáng)，純化時(shí)需要在變性條件下洗脫；而鏈霉親和素對(duì)亞氨基生物素的親和力相對(duì)較弱，可以在 pH 9.5-11.0 結(jié)合，pH 4.0 時(shí)洗脫，不需要使用變性劑，所以能更好的保持親和素偶聯(lián)物的活性。
BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 1ML是裝填了Streptavidin Agarose Resin 6FF的一種中壓預(yù)裝柱，規(guī)格1 mL，預(yù)裝柱具有標(biāo)準(zhǔn)接口，可以適配商品化的各類中壓色譜系統(tǒng)，如ÄKTA 等，方便客戶操作。
產(chǎn)品性質(zhì)
基質(zhì)（Matrix） | 高度交聯(lián)的6%瓊脂糖微球 |
配體（Ligand） | 鏈霉親和素 |
粒徑（Bead size） | 45-165 µm |
載量（Capacity） | >200 nmol Biotin/mL介質(zhì) |
大壓力（PressureMax） | 0.3 MPa，3 bar |
pH穩(wěn)定范圍（pH range） | 2-10 |
儲(chǔ)存緩沖液（Buffer） | 20%乙醇 |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。4℃保存，有效期2年。
需準(zhǔn)備試劑
所用水和Buffer在使用前///好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過(guò)濾除菌。
生物素或生物素化物質(zhì)的純化
結(jié)合/洗雜緩沖液：150 mM NaCl，20 mM NaH2PO4，pH 7.4
洗脫緩沖液：8 M鹽酸胍，pH 1.5
亞氨基生物素標(biāo)簽物質(zhì)的純化
結(jié)合/洗雜緩沖液：50 mM碳酸銨，0.5 M NaCl，pH 10.0
洗脫緩沖液：50 mM碳酸銨，0.5 M NaCl，pH 4.0
使用方法
【注】樣品在上樣前///好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過(guò)濾，減少雜質(zhì)以防阻塞柱子。另外，確保樣品溶液有合適的離子強(qiáng)度和pH值，可以用結(jié)合/洗滌緩沖液對(duì)血清樣品、腹水或細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋，或者樣品用結(jié)合/洗滌緩沖液透析。
1樣品純化（以ÄKTA為例）
1）準(zhǔn)備：將泵管道中注滿去離子水。去掉上塞子，將層析柱連接至色譜系統(tǒng)中。再折斷下口，將預(yù)裝柱接到色譜系統(tǒng)中，并旋緊。
2）清洗：3-5倍柱體積去離子水沖洗層析柱中儲(chǔ)存液。
3）平衡：用5倍柱體積的結(jié)合Buffer平衡層析柱，使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下，起到保護(hù)蛋白的作用。
4）上樣：將樣品加到平衡好的層析柱中，推薦流速1 mL/min，保證目的蛋白與樹(shù)脂充分接觸，提高目的蛋白的回收率，收集流出液，待檢測(cè)。
【注】樣品的粘度增加使得即使上樣體積很少，也會(huì)導(dǎo)致層析柱很大的反壓。上樣量不要超過(guò)柱子的結(jié)合能力。大量的樣品體積也可能造成很大的反壓，使得進(jìn)樣器更難使用。
5）洗雜：用10-15倍柱體積的洗雜Buffer進(jìn)行清洗，直到紫外吸收達(dá)到一個(gè)穩(wěn)定的基線，去除非特異性吸附的雜蛋白，收集洗雜液，待檢測(cè)。
6）洗脫：用洗脫Buffer 采用一步法或線性梯度洗脫。一步洗脫中，通常5倍柱體積洗脫液足夠?qū)⒛康牡鞍紫疵撓聛?lái)。也可以用一個(gè)小的梯度，例如20倍柱體積或更多，來(lái)分離不同結(jié)合強(qiáng)度的蛋白質(zhì)。
7）清洗及保存：依次使用3倍柱體積的結(jié)合Buffer和5倍柱體積的去離子水平衡填料，后再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡，然后保存在等體積的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被細(xì)菌污染。
2 SDS-PAGE檢測(cè)
將純化過(guò)程中得到的樣品（包括原始樣品、流出組分、洗雜及洗脫組分等）利用SDS-PAGE進(jìn)行檢測(cè)，判定其純化效果。
【注】由于鹽酸胍的帶電性強(qiáng)，會(huì)中和SDS的電荷，影響后面蛋白在上樣緩沖液里的帶電性能，電泳時(shí)產(chǎn)生沉淀，導(dǎo)致無(wú)法電泳。因此后續(xù)可以對(duì)樣本進(jìn)行透析或者鹽析（透析可利用透析袋，PBS作為透析液，透析兩次，每次1小時(shí)，透析液的體積可控制在樣本的100倍）。
3 填料清洗
隨著非特異結(jié)合蛋白的增多和蛋白的聚集，會(huì)造成流速和結(jié)合載量性能下降，此時(shí)需對(duì)填料進(jìn)行清洗。
1）去除一些沉淀或變形物質(zhì)
用2倍柱體積的0.1 M NaOH或6 M鹽酸胍或8 M尿素溶液進(jìn)行清洗，然后立即用5倍柱體積的PBS，pH 7.4清洗。
2）去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質(zhì)
用3-4倍柱體積的70%乙醇或2倍柱體積1% Triton X-100清洗，然后立即用5倍柱體積的PBS，pH 7.4清洗。
注意事項(xiàng)
1）請(qǐng)勿冷凍保存本產(chǎn)品。
2）所有操作過(guò)程中，樣本需要在4℃或冰上操作。
3）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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