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標(biāo)簽： 大鼠 主動(dòng)脈 內(nèi)皮細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng)
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)可以：（1）用于血液流動(dòng)性、防止血栓形成、調(diào)節(jié)血管張力等研究；（2）用于選擇性通透性以及免疫調(diào)節(jié)等方面研究。
實(shí)驗(yàn)方法
- 貼塊法
| 實(shí)驗(yàn)方法原理 | 貼塊法適用于內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)量低的、管徑較小血管的內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)，其方法較酶消化法簡便、經(jīng)濟(jì)。但缺點(diǎn)使易混有成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，前者的貼壁時(shí)間和內(nèi)皮接近，后者貼壁較內(nèi)皮慢，而且會(huì)被肝素所抑制。 |
|---|---|
| 實(shí)驗(yàn)材料 | 雄性Wistar大鼠 |
| 試劑、試劑盒 | DMEM 胎牛血清 內(nèi)皮細(xì)胞生長因子 肝素鈉 青鏈霉素 明膠 胰蛋白酶 PBS D-Hanks’液 |
| 儀器、耗材 | 手術(shù)器械 眼科剪 眼科鑷 培養(yǎng)皿 手術(shù)刀 培養(yǎng)瓶 CO2培養(yǎng)箱 |
| 實(shí)驗(yàn)步驟 | 一、實(shí)驗(yàn)方法
|
| 其他 | 一、實(shí)驗(yàn)討論
植塊培養(yǎng)法適用于內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)量低的、管徑較小血管的內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)，其方法較酶消化法簡便、經(jīng)濟(jì)。但缺點(diǎn)使易混有成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，前者的貼壁時(shí)間和內(nèi)皮接近，后者貼壁較內(nèi)皮慢，而且會(huì)被肝素所抑制。
而由于成纖維細(xì)胞生長較快，隨著傳代次數(shù)越多，其污染的程度越重，從而使培養(yǎng)失敗。因而，抑制和減少成纖維細(xì)胞是大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵問題。本法采用的方法是：
組織塊貼塊的時(shí)候，不可避免會(huì)有一些塊貼的方向不是內(nèi)膜面，那么zui后將爬不出內(nèi)皮，甚至長出較多雜質(zhì)細(xì)胞，需刮除。
另外，部分塊即使大小合適，方向也正確，也可能爬不出來，去除組織塊的時(shí)候，應(yīng)該以大局為重，看到內(nèi)皮細(xì)胞已經(jīng)爬出較多，而雜質(zhì)細(xì)胞也開始爬出的時(shí)候，就要果斷地去除組織塊了。72 h 只是個(gè)大概的時(shí)間，初學(xué)者不可以拘泥。 |
