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生物化學(xué)技術(shù)專題:皂苷的鑒別

2014-1-14  閱讀(1079)

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1.檢品溶液的制備:

1)取皂角碎塊1g于大試管(或小燒杯)中,加蒸餾水15ml,于30~90°水浴上浸漬15分鐘后過(guò)濾,濾液供鑒別用。

2)取薯蕷碎塊0.5g加上法同樣制備得薯蕷水浸液。

3)取薯蕷碎塊0.5g于大試管或小錐形瓶中加95%乙醇10ml于水浴上溫浸15分鐘,濾液供鑒別。
 

2.鑒別試驗(yàn):

(1)溶血試驗(yàn):取濾紙片一小塊,于小心處滴加皂角浸液一滴,待干后于同處再滴加一滴,如是反復(fù)操作至滴加數(shù)滴,干燥后無(wú)噴霧血球試液(取牛血、羊血或兔血一份,用玻棒或棉簽攪和,除去凝集的血蛋白,加pH7.4磷酸鹽緩沖液一份稀釋即得),數(shù)分鐘后觀察在紅色的背底中是否出現(xiàn)無(wú)紅色的黃色(或透明)斑點(diǎn)(中心處皂解浸液原點(diǎn))。(本反應(yīng)亦可在試管中進(jìn)行,血球試液中草藥浸液中的皂苷溶解后,血球液由渾濁變?yōu)槌蚊?。此外還可在載玻片上進(jìn)行,并在顯微鏡下觀察血球破裂溶解前后的狀況)。

(2)泡沫試驗(yàn):薯蕷浸液,皂角浸液各2ml,分別置于試管中。用力振搖一分鐘后放置,在10分鐘內(nèi)觀察二管是否都有持久性泡沫產(chǎn)生?

(3)醋酐濃硫酸試驗(yàn)(Liebermann-Burchard反應(yīng)),皂角浸液5ml,于蒸發(fā)皿中在水浴上蒸干,加入1ml醋酐使其溶解,滴于干燥比色盤(pán)中,從邊沿緩緩滴加濃硫酸1滴,觀察顏色變化。

另取薯蕷浸液5ml,置于蒸發(fā)皿中,在水浴上蒸干,加入1ml醋酐溶液,并傾入比色盤(pán)中,(試管)沿管壁加入幾滴濃硫酸,觀察界面間是否有紫紅色環(huán)產(chǎn)生?

(4)氯仿-濃硫酸試驗(yàn)(Salkowski反應(yīng)):取薯蕷醇浸液2ml,在水浴上蒸干,有氯仿1ml溶解,轉(zhuǎn)入干燥小試管中,沿壁小心加濃硫酸1ml,氯仿層顯紅或蘭色,硫酸層有綠色熒光,示含甾體皂苷。

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