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32D細(xì)胞,小鼠IL-3依賴性32D細(xì)胞株

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32D細(xì)胞,小鼠IL-3依賴性32D細(xì)胞株污染問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果;細(xì)胞活性問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,我們調(diào)查核實(shí)后予免費(fèi)調(diào)換,不收取任何費(fèi)用。

需要客戶提供細(xì)胞培養(yǎng)說明、細(xì)胞操作處理方法、細(xì)胞質(zhì)量問題反饋表;如果搞不清原因的,或者客戶直接愿意支付購(gòu)買價(jià)半價(jià)的費(fèi)用直接復(fù)蘇。

如用戶收到細(xì)胞8-30天之內(nèi),因處理不當(dāng)造成細(xì)胞死亡或污染,我公司將以五折優(yōu)惠價(jià)重新提供一株原細(xì)胞。

細(xì)胞活力狀態(tài)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力。

客戶收到T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞:

1、客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)32D細(xì)胞,小鼠IL-3依賴性32D細(xì)胞株進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;

2、如為貼壁細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度:

A)未超過80%匯合度時(shí),用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水)噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作;然后打開蓋子,先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴(yán)禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時(shí)間根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存。

B)超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1) 棄去培養(yǎng)液,用3ml PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次;

2) 1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來;

3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,按要求分瓶。

332D細(xì)胞,小鼠IL-3依賴性32D細(xì)胞株如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

注意:換液時(shí)一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

GRC-1人腎癌細(xì)胞

A498人腎癌細(xì)胞

OS-RC-2人腎癌細(xì)胞

SKRC39人腎乳頭狀細(xì)胞癌細(xì)胞

786-0人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞

SW038-C2人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

BT-325人腦多形性膠質(zhì)瘤細(xì)胞

SF-295XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞

SK-N-SH人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

U87     人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

SH-SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

SHG-44人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

SKMG4人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

SF-268人神經(jīng)癌細(xì)胞

ARO     甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)

A-375人惡性黑色素瘤細(xì)胞

M6細(xì)胞     

A431人表皮癌細(xì)胞

SW1353人骨肉瘤細(xì)胞

SH-5YSY細(xì)胞  

MG-63人成骨肉瘤細(xì)胞

HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞

RD人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞

D407人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

L929    小鼠成纖維細(xì)胞

NIH/3T3    NIH小鼠成纖維細(xì)胞(NIH/swiss)

MEF     小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

C2C12小鼠成肌細(xì)胞

2T3     小鼠成骨細(xì)胞

NRK     大鼠腎細(xì)胞

HBZY-1大鼠腎小球系膜細(xì)胞

BRL      大鼠肝細(xì)胞

V79     倉(cāng)鼠肺細(xì)胞

CHO    倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞

Vero    非洲綠猴腎細(xì)胞

Vero C1008(E6)非洲綠猴腎細(xì)胞

COS-7非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞

PA317逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的鼠胚胎成纖維細(xì)胞

MA-104恒河猴腎細(xì)胞

MDCK狗腎細(xì)胞

TC-1    小鼠肺上皮細(xì)胞細(xì)胞

PK-15豬腎細(xì)胞

H22     小鼠肝癌細(xì)胞

RM-1小鼠前列腺癌細(xì)胞

HePa 1-6  小鼠肝癌細(xì)胞

Lewis小鼠肺癌細(xì)胞

CT-26小鼠結(jié)腸腺癌

S-180小鼠腹水瘤細(xì)胞

B16     小鼠黑色瘤細(xì)胞

P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞

P388小鼠白血病細(xì)胞

YAC-1小鼠淋巴瘤細(xì)胞

Renca小鼠腎癌細(xì)胞

RAW 264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞

Walker-256大鼠肝癌細(xì)胞

CBRH-7919大鼠肝癌細(xì)胞

C6大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞

RIN-m褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞

DCS小鼠樹突樣細(xì)胞

LC540睪丸間充質(zhì)細(xì)胞

LETP-A-2人肺腺癌細(xì)胞

NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞

FRTL-5細(xì)大鼠甲狀腺內(nèi)泡細(xì)胞

GIST-882人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞

BAF3小鼠原B細(xì)胞

WEHI-3細(xì)小鼠血液細(xì)胞

32D小鼠IL-3依賴性32D細(xì)胞

慧穎細(xì)胞庫(kù)會(huì)根據(jù)氣溫情況分別按照:復(fù)蘇、凍存、2ML凍存管(全血清包被)等形式運(yùn)輸32D細(xì)胞,小鼠IL-3依賴性32D細(xì)胞株,短途運(yùn)輸問題不大??墒情L(zhǎng)途天熱時(shí),我們要做好相應(yīng)的運(yùn)輸安全措施。活細(xì)胞的運(yùn)輸方法相對(duì)比較簡(jiǎn)單,a)將該瓶細(xì)胞裝滿培養(yǎng)基,這樣做的目的是讓所有細(xì)胞都始終有營(yíng)養(yǎng)供給。b)用酒精擦拭培養(yǎng)瓶,瓶口用封口膜包好。c)細(xì)胞取回后,半量換液。冬天則是采用全血清包被細(xì)胞運(yùn)輸,細(xì)胞運(yùn)輸中處于休眠狀態(tài),收到細(xì)胞以后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作;然后將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶,加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞匯合度:若未超過80%匯合度,換液繼續(xù)培養(yǎng),根據(jù)情況傳代或者凍存。若超過80%匯合度,可直接進(jìn)行傳代。

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