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細(xì)胞流式單標(biāo)實(shí)驗(yàn)

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產(chǎn)品型號(hào)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-12-23 10:44:08瀏覽次數(shù):875次

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細(xì)胞流式單標(biāo)實(shí)驗(yàn):是達(dá)為科生物較為成熟的一項(xiàng)技術(shù)服務(wù)之一,由細(xì)胞平臺(tái)經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員操作完成。

準(zhǔn)備單細(xì)胞懸液:淋巴組織、骨髓、血液或培養(yǎng)的細(xì)胞。
用冰染色緩沖液洗細(xì)胞2次,離心細(xì)胞,用冰染色緩沖液重懸細(xì)胞,使終濃度為2×107細(xì)胞/ml。
各取50ul(106細(xì)胞)細(xì)胞懸液到2個(gè)圓底的Ep管中。
根據(jù)抗體說明書在其中1個(gè)Ep管中加入合適的抗體量,另外1個(gè)加入同型對(duì)照抗體,冰上避光孵育20分鐘(建議每5分鐘輕輕混勻,以免細(xì)胞沉積)。根據(jù)熒光抗體的親和力適當(dāng)延長染色時(shí)間。
用1ml染色緩沖液洗2次去除未結(jié)合的抗體,300×g離心5分鐘,每次離心后小心吸取上清。
用適量染色緩沖液(如500ul)重懸細(xì)胞。
 流式細(xì)胞儀分析染色結(jié)果(不超過4小時(shí))。如果暫時(shí)無法檢測,也可以將染色后的細(xì)胞用4%多聚甲醛固定后,避光儲(chǔ)存在4度。固定后的細(xì)胞可以保存多一個(gè)星期。

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