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引 言

液相色譜的檢測器包括選擇型檢測器和通用型檢測器，選擇型檢測器包括紫外可變波長檢測器（VWD），光電二極管陣列檢測器（DAD）和熒光檢測器（FLD）等；通用型檢測器包括示差折光檢測器（RID），蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）和電霧式檢測器（CAD）。示差檢測器屬于濃度型通用檢測器，CAD 屬于質(zhì)量型通用檢測器。CAD 的靈敏度高，可以運行梯度方法，非常適合靈敏度要求高的復(fù)雜成分分析。示差折光檢測器是最經(jīng)典的通用型檢測器，只要被測組分與洗脫液的折光率有差別就可使用，但是只能運行等度方法。液相色譜分析里，針對沒有紫外吸收的糖類化合物的定量分析和大分子聚合物的分子量分析，一般常用示差檢測器。目前有大量的檢測標準使用示差檢測器，涵蓋了制藥、食品和化工等多個領(lǐng)域。

圖1：示差檢測器原理圖

Thermo Scientific™ Vanquish™ 示差折光檢測器(RID)是賽默飛推出的新一代示差通用檢測器。Vanquish RID 可以輕松集成到 Vanquish HPLC 和 UHPLC 系統(tǒng)中，節(jié)省工作臺的空間并簡化儀器的整體處理過程。該檢測器與 Thermo Scientific™ Chromeleon™ 色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)(CDS)軟件完全集成，可以以最高 50Hz 的數(shù)據(jù)采集速率進行實驗，實現(xiàn)卓越的重現(xiàn)性和樣品通量，從而為常規(guī)實驗室提供獨特的體驗。

Vanquish 新一代示差檢測器亮點

低基線漂移和噪聲，保證基線足夠穩(wěn)定

恒溫光學(xué)工作臺和流通池主動加熱，實現(xiàn)高可重復(fù)性

高流速范圍和寬線性范圍，確保與多種應(yīng)用兼容

智能啟動功能，自動執(zhí)行 Purge、平衡、自動調(diào)零以及基線穩(wěn)定性和噪聲控制功能

與反相和正相溶劑完全相容

Vanquish HPLC 和 UHPLC 系統(tǒng)與 Vanquish RID 通過深度優(yōu)化的流路連接，結(jié)合 Thermo Scientific™ Chromeleon™ 色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng) (CDS) 軟件實現(xiàn)單點智能控制，從而提供高度集成的解決方案

案例分享 1

本案例采用 Vanquish Flex UHPLC 系統(tǒng)搭配 Vanquish 新一代示差折光檢測器，快速分析了乳制品中的牛甲狀腺球蛋白、牛丙種球蛋白、雞卵清蛋白和馬肌紅蛋白以及實際樣品，可以為乳制品行業(yè)中蛋白質(zhì)材料的質(zhì)量控制提供一種經(jīng)濟高效的解決方案。

圖 2 中 A 為使用 HPLC SEC 色譜柱（300 × 7.8 mm，3 µm）的色譜圖，B 為使用 UHPLC SEC 色譜柱（300 × 4.6 mm，1.9 µm）的色譜圖。使用亞 2 微米的超高效體積排阻色譜柱后，分析時間從 20 分鐘縮短為 10 分鐘，同時四種蛋白的峰形和分離度更好。支持高數(shù)據(jù)采集速率的 Vanquish 新一代示差檢測器和亞 2 微米超高效體積排阻色譜柱結(jié)合，可以實現(xiàn)快速分析，為質(zhì)量控制實驗室提供顯著的優(yōu)勢，有助于其實現(xiàn)產(chǎn)品表征的高通量篩選方法。

圖2：使用 HPLC SEC 色譜柱 (A) 和 UHPLC SEC 色譜柱 (B) 時蛋白質(zhì)混合物標準品的 RID 色譜圖，牛甲狀腺球蛋白 (1)、牛丙種球蛋白 (2)、雞卵清蛋白 (3) 和馬肌紅蛋白 (4)

案例分享 2

根據(jù) 2020 版藥典四部藥用輔料中乳糖的測定方法，使用 Vanquish Core 液相搭配 Vanquish 新一代示差檢測器，采用賽默飛 Hypersil APS-2（4.6×250mm，5μm）色譜柱進行分析。結(jié)果表明乳糖和蔗糖的響應(yīng)和分離度良好。新標準中要求柱溫和檢測器溫度均為 30℃，賽默飛新一代示差采用恒溫光學(xué)工作臺和流通池主動加熱技術(shù)，可以很好的保證基線穩(wěn)定和重復(fù)性。

圖3 ：乳糖和蔗糖對照品溶液疊加色譜圖

結(jié) 論

Vanquish 新一代示差檢測器可以輕松集成到 Vanquish HPLC 和 UHPLC 系統(tǒng)中，節(jié)省工作臺的空間并簡化儀器的整體處理過程。該檢測器與 Chromeleon™ 色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)軟件完全集成，可以以高數(shù)據(jù)采集速率進行實驗，結(jié)合亞 2 微米的超高效色譜柱，可以實現(xiàn)快速分析，為用戶提供了一種高通量的質(zhì)量表征利器。