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Sulfo-Cy7 NHS Ester是一種高性能的可見光熒光染料,專門設(shè)計用于生物分子標(biāo)記、熒光成像和分析應(yīng)用。作為Cyanine染料系列的一員,Sulfo-Cy7具有長波長的近紅外(NIR)發(fā)射特性,使其在生物成像和檢測中表現(xiàn)出色。其NHS酯基團(tuán)(N-羥基琥珀酰亞胺酯)能夠與生物分子中的伯胺基團(tuán)共價結(jié)合,形成穩(wěn)定的酰胺鍵,從而使其能夠高效地標(biāo)記蛋白質(zhì)、抗體、核酸和其他生物分子。
Sulfo-Cy7的光學(xué)特性使其特別適合用于多重?zé)晒獬上?、流式?xì)胞術(shù)、分子探針開發(fā)和體內(nèi)成像等應(yīng)用。其水溶性結(jié)構(gòu)進(jìn)一步提升了其在生物體系中的適用性,減少了非特異性結(jié)合和背景熒光的干擾,為科研和診斷提供了強有力的工具。
2. 可見光熒光染料Sulfo-Cy7 NHS Ester:關(guān)鍵特性與結(jié)構(gòu)
2.1 近紅外熒光發(fā)射
Sulfo-Cy7的熒光發(fā)射波長通常在750-775 nm之間,位于近紅外光譜區(qū)域。這一特性使得它能夠在生物組織中實現(xiàn)更深的穿透,且背景干擾較低。相比于傳統(tǒng)的可見光熒光染料,Sulfo-Cy7能夠在復(fù)雜的生物環(huán)境中提供更清晰的成像。
2.2 NHS酯基團(tuán)活性
Sulfo-Cy7 NHS Ester中的NHS酯基團(tuán)能夠與生物分子中的伯胺基團(tuán)(-NH?)進(jìn)行快速且高效的共價結(jié)合。這一反應(yīng)通常在溫和的生理條件下進(jìn)行,不會對被標(biāo)記的生物分子造成的結(jié)構(gòu)或功能干擾。生成的酰胺鍵非常穩(wěn)定,確保了標(biāo)記物的長時間使用和儲存。
2.3 水溶性設(shè)計
Sulfo-Cy7的水溶性結(jié)構(gòu)使其在水性介質(zhì)中具有良好的溶解性和分散性。與非水溶性的熒光染料相比,Sulfo-Cy7在生物體系中的應(yīng)用更加廣泛,且易于操作。水溶性設(shè)計還減少了染料在細(xì)胞和組織中的非特異性結(jié)合,降低了背景熒光,提高了信噪比。
3. 可見光熒光染料Sulfo-Cy7 NHS Ester:應(yīng)用領(lǐng)域
3.1 高分辨率熒光成像
Sulfo-Cy7 NHS Ester廣泛應(yīng)用于高分辨率熒光成像技術(shù)中。其近紅外發(fā)射特性使其成為深層組織成像的理想選擇,尤其適用于活體成像和體內(nèi)生物分子探測。研究人員可以通過標(biāo)記特定的生物分子或細(xì)胞,觀察其在體內(nèi)的分布和動態(tài)變化,獲取高質(zhì)量的成像數(shù)據(jù)。
3.2 多重標(biāo)記與檢測
Sulfo-Cy7的熒光發(fā)射波長遠(yuǎn)離常見的綠色、黃色和紅色熒光染料,使其在多重標(biāo)記實驗中發(fā)揮重要作用。研究人員可以將其與其他熒光染料結(jié)合使用,在同一實驗中同時檢測多個生物分子或細(xì)胞群體,極大地提高了實驗的通量和數(shù)據(jù)的豐富性。
3.3 流式細(xì)胞術(shù)
在流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用中,Sulfo-Cy7 NHS Ester用于標(biāo)記抗體或其他生物分子,以便于識別和分選特定細(xì)胞類型。其長波長發(fā)射和水溶性特性使其在流式細(xì)胞儀的多色檢測中表現(xiàn)出色,能夠在不干擾其他染料的情況下提供準(zhǔn)確的細(xì)胞表型分析。
3.4 體內(nèi)成像與藥物遞送
Sulfo-Cy7在體內(nèi)成像領(lǐng)域同樣具有重要應(yīng)用,特別是在藥物遞送和靶向治療的研究中。通過將Sulfo-Cy7標(biāo)記到藥物分子或納米顆粒上,研究人員可以追蹤藥物在體內(nèi)的分布、吸收、代謝和排泄過程,幫助優(yōu)化藥物設(shè)計和療效評估。
4. 使用方法
使用Sulfo-Cy7 NHS Ester進(jìn)行生物分子標(biāo)記和成像的典型步驟如下:
溶液制備:將1mg的Sulfo-Cy7 NHS Ester溶解在適當(dāng)?shù)臒o水有機溶劑中,如DMSO或DMF,以制備高濃度的母液。為了確保NHS酯基團(tuán)的活性,操作應(yīng)盡量在無水條件下進(jìn)行。
標(biāo)記反應(yīng):將Sulfo-Cy7溶液添加到含有伯胺基團(tuán)的生物分子溶液中,通常在pH 7.4-8.5的緩沖液中進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)時間一般為30分鐘至2小時,具體時間根據(jù)生物分子類型和實驗條件進(jìn)行調(diào)整。
純化標(biāo)記產(chǎn)物:反應(yīng)完成后,通過透析、凝膠過濾或離心過濾等方法去除未反應(yīng)的染料,獲得純化的Sulfo-Cy7標(biāo)記物。
檢測與成像:使用適當(dāng)?shù)臒晒怙@微鏡、熒光光譜儀或流式細(xì)胞儀檢測標(biāo)記物的熒光信號。Sulfo-Cy7的發(fā)射波長在750-775 nm之間,選擇合適的濾光片和激發(fā)波長以獲得最佳的檢測。
5. 產(chǎn)品優(yōu)勢
5.1 優(yōu)異的光學(xué)性能
Sulfo-Cy7 NHS Ester的近紅外發(fā)射特性使其在生物成像中具有優(yōu)勢,特別是在深層組織和體內(nèi)成像中能夠提供清晰的成像。相比于傳統(tǒng)熒光染料,Sulfo-Cy7能夠更有效地減少生物組織中的自發(fā)熒光和背景干擾。
5.2 高效的標(biāo)記反應(yīng)
NHS酯基團(tuán)能夠在溫和的生理條件下高效標(biāo)記含有伯胺基團(tuán)的生物分子,且標(biāo)記產(chǎn)物穩(wěn)定,適合長時間儲存和使用。這使得Sulfo-Cy7 NHS Ester在各種生物標(biāo)記應(yīng)用中表現(xiàn)出色,尤其是在復(fù)雜的多重標(biāo)記實驗中。
5.3 水溶性
Sulfo-Cy7的水溶性結(jié)構(gòu)不僅提高了其在水性介質(zhì)中的溶解性,還減少了在生物樣品中的非特異性結(jié)合,確保了較高的信噪比和準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。這一特性特別適合在細(xì)胞和組織的標(biāo)記實驗中使用。
5.4 廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域
Sulfo-Cy7 NHS Ester在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中的應(yīng)用廣泛,涵蓋了從基礎(chǔ)研究到新藥開發(fā)、從體外分析到體內(nèi)成像的各個領(lǐng)域。其優(yōu)異的性能為科研人員和臨床醫(yī)生提供了強大的工具,幫助他們深入探索生物系統(tǒng)中的復(fù)雜機制和過程。
6. 注意事項
操作條件:Sulfo-Cy7 NHS Ester在標(biāo)記反應(yīng)中對水分較為敏感,建議在無水條件下操作,并盡量避免染料長時間暴露在空氣中,以防止NHS酯基團(tuán)的水解失效。
儲存條件:未使用的Sulfo-Cy7 NHS Ester應(yīng)存放在-20°C的干燥避光環(huán)境中,以保持其活性和穩(wěn)定性。溶解后的溶液應(yīng)盡快使用或分裝后冷凍保存。
反應(yīng)優(yōu)化:在不同類型的生物分子標(biāo)記實驗中,可能需要優(yōu)化反應(yīng)條件(如pH值、反應(yīng)時間和溫度)以獲得最佳的標(biāo)記效率和產(chǎn)物質(zhì)量。
7. 實驗應(yīng)用實例
在腫瘤成像研究中,研究人員使用Sulfo-Cy7 NHS Ester標(biāo)記了一種靶向抗體,通過近紅外熒光成像技術(shù)成功實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的高特異性檢測。相比于傳統(tǒng)的熒光染料,Sulfo-Cy7提供了更清晰的成像,提高了腫瘤檢測的準(zhǔn)確性,為個性化治療策略的制定提供了重要依據(jù)。