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熒光素酶發(fā)光底物Furimazine(Fz)1 mg是一種高效能的熒光素酶發(fā)光底物,廣泛用于生物發(fā)光成像(bioluminescence imaging)和其他相關(guān)研究領(lǐng)域。它的化學(xué)結(jié)構(gòu)和反應(yīng)機(jī)制使其成為基于NanoLuc®熒光素酶(NanoLuc® Luciferase)的發(fā)光系統(tǒng)中的核心成分。下面是關(guān)于Furimazine的詳細(xì)介紹。
1. 熒光素酶發(fā)光底物Furimazine(Fz)1 mg:化學(xué)性質(zhì)與結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
Furimazine 的化學(xué)分子式為C??H??N?O?,是一種復(fù)雜的芳香族化合物。它屬于吡咯并[3,2-b]吡咯類衍生物,具有多個(gè)取代基位點(diǎn)。這些結(jié)構(gòu)特點(diǎn)使Furimazine在與NanoLuc®熒光素酶反應(yīng)時(shí)能夠產(chǎn)生強(qiáng)烈而穩(wěn)定的發(fā)光信號。
與其他傳統(tǒng)的熒光素酶底物不同,F(xiàn)urimazine 在使用過程中展現(xiàn)出的量子效率和靈敏度。其化學(xué)穩(wěn)定性使其在實(shí)驗(yàn)條件下不易降解,能夠長時(shí)間保持其發(fā)光能力。這一特性在長時(shí)間的生物發(fā)光成像實(shí)驗(yàn)中尤為重要,因?yàn)樗梢源_保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
2. 生物發(fā)光機(jī)制
Furimazine 是NanoLuc®熒光素酶系統(tǒng)的專用底物。在發(fā)光反應(yīng)中,F(xiàn)urimazine 被NanoLuc®熒光素酶氧化,生成一種激發(fā)態(tài)的中間體,該中間體隨后通過放射光子的方式回到基態(tài),從而產(chǎn)生生物發(fā)光信號。這個(gè)發(fā)光過程具有以下幾個(gè)顯著特點(diǎn):
高靈敏度:Furimazine 與NanoLuc®熒光素酶的反應(yīng)非常高效,能夠檢測到極低濃度的熒光素酶,因此適用于低表達(dá)水平的基因或蛋白質(zhì)的檢測。
快速響應(yīng):Furimazine 在加入熒光素酶后迅速發(fā)生反應(yīng),幾乎即時(shí)產(chǎn)生發(fā)光信號,這對于需要快速數(shù)據(jù)獲取的實(shí)驗(yàn)非常有利。
長信號持續(xù)時(shí)間:發(fā)光信號能夠持續(xù)較長時(shí)間,允許研究人員在較長的時(shí)間窗內(nèi)進(jìn)行信號捕捉和分析。
3. 應(yīng)用領(lǐng)域
3.1 活體成像
Furimazine 主要用于活體生物發(fā)光成像。其強(qiáng)大的發(fā)光性能使其在小動(dòng)物模型的體內(nèi)成像中表現(xiàn)出色,能夠幫助研究人員可視化和量化活體動(dòng)物體內(nèi)的基因表達(dá)、細(xì)胞追蹤以及病理狀態(tài)的變化。例如,在腫瘤模型中,F(xiàn)urimazine 能夠清晰地顯示腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移過程,為癌癥研究提供了重要的數(shù)據(jù)支持。
3.2 高通量篩選
在藥物研發(fā)中,F(xiàn)urimazine 被廣泛用于高通量篩選實(shí)驗(yàn)。通過將Furimazine與NanoLuc®熒光素酶系統(tǒng)結(jié)合,研究人員可以快速篩選出對特定靶標(biāo)有作用的化合物。這種方法不僅提高了篩選效率,還減少了實(shí)驗(yàn)材料的浪費(fèi),優(yōu)化了整個(gè)藥物篩選流程。
3.3 信號通路分析
Furimazine 在信號通路研究中的應(yīng)用也非常廣泛。通過報(bào)告基因系統(tǒng),研究人員可以使用Furimazine檢測細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)事件。由于Furimazine的高靈敏度,即使是細(xì)微的信號變化也能被捕捉到,幫助研究人員深入了解復(fù)雜的細(xì)胞信號網(wǎng)絡(luò)。
4. 使用與操作
使用Furimazine進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),通常需要將其溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?,如乙醇或DMSO(二甲基亞砜)。溶解后的Furimazine應(yīng)盡快使用,因?yàn)殚L時(shí)間存放可能導(dǎo)致發(fā)光效率的下降。實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)確保Furimazine的溶液是新鮮配制的,并且在避光、低溫條件下保存。
Furimazine 與NanoLuc®熒光素酶的反應(yīng)條件通常包括室溫環(huán)境和生理pH值的緩沖液。在標(biāo)準(zhǔn)條件下,F(xiàn)urimazine的發(fā)光反應(yīng)不需要額外的輔酶或添加劑,這使得實(shí)驗(yàn)操作更加簡便和快速。
5. 注意事項(xiàng)與存儲(chǔ)
Furimazine 是一種敏感的化合物,在使用和存儲(chǔ)過程中需要注意以下幾點(diǎn):
避光保存:Furimazine 對光敏感,長時(shí)間暴露在光線下可能會(huì)導(dǎo)致降解。因此,應(yīng)將其儲(chǔ)存在避光的容器中,并在暗處操作。
低溫存儲(chǔ):Furimazine 應(yīng)存放在-20°C或更低的溫度下,避免頻繁的凍融循環(huán),以保持其穩(wěn)定性。
避免與強(qiáng)氧化劑接觸:Furimazine在化學(xué)性質(zhì)上容易受到強(qiáng)氧化劑的影響,因此在實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)避免與此類化合物接觸,以防止反應(yīng)失效或產(chǎn)生副產(chǎn)物。
6. 總結(jié)
Furimazine 作為NanoLuc®熒光素酶系統(tǒng)的核心發(fā)光底物,憑借其高靈敏度、快速響應(yīng)和穩(wěn)定性,在生物發(fā)光成像、高通量篩選以及信號通路研究等領(lǐng)域表現(xiàn)出了應(yīng)用價(jià)值。其性能使得研究人員能夠在各種復(fù)雜的生物系統(tǒng)中準(zhǔn)確地進(jìn)行基因表達(dá)和蛋白質(zhì)活性分析。
隨著生物技術(shù)的發(fā)展,F(xiàn)urimazine 在未來的研究中將繼續(xù)扮演重要角色,推動(dòng)生物發(fā)光技術(shù)在基礎(chǔ)研究和應(yīng)用開發(fā)中的進(jìn)一步普及和深入應(yīng)用。無論是在藥物開發(fā)、疾病研究還是生物工程領(lǐng)域,F(xiàn)urimazine 都為科學(xué)家們提供了一個(gè)強(qiáng)有力的工具,有助于揭示生命過程中的關(guān)鍵機(jī)制。