白細胞介素1受體銜接蛋白抗體

1、制備抗原。

2、選擇實驗動物。

3、動物免疫。

4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動物而言，是良好的抗原物質(zhì)。可以刺激異種動物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標記反應中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實驗動物 兔

4．其它材料及試劑

The Toll-like receptor (TLR) family in mammals comprises a family of transmembrane proteins characterized by multiple copies of leucine rich repeats in the extracellular domain and IL-1 receptor motif in the cytoplasmic domain.

C3H/10T1/2, Clone 8小鼠胚胎成纖維細胞 C3H/10T1/2, Clone 8 mouse embryonic fibroblast MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS 大鼠細胞球蛋白(CYGB)ELISA試劑盒 bFGF(Human basic fibroblast growth factor)  人堿性成纖維細胞生長因子 96T

MMP9： 基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體 INSR Others Human 人 Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Long Isoform ) 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0345HB611(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠細胞膜鈣轉(zhuǎn)運ATP酶1(ATP2B1)ELISA試劑盒 sCD14  大鼠可溶性CD14 96T

MIS12： 染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4

NCI-H520(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 T/G HA-VSMC(人主動脈血管平滑肌細胞) 大鼠細胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA試劑盒 A Beta1-42(Mouse amyloid beta peptide 1-42)  小鼠β淀粉樣蛋白1-42 96T

HRG beta 1： 癌細胞分化因子P45抗體 猴源細胞 T細胞白血病，6T-CEM細胞 COLO-320(結(jié)腸腺癌細胞)

REG4 Others Rat 大鼠 REG4 人細胞裂解液 (陽性對照) 人單皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA 試劑盒 phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)peptide 異染色質(zhì)蛋白1(0酸化多肽) 0.5mg

Hepatic lipase： 肝脂酶抗體 CM-M018小鼠頜下腺上皮細胞培養(yǎng)基100mL

U251細胞，人星形膠質(zhì)瘤細胞 痢疾志賀氏菌 二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr- 人單皰疹病毒抗原1(HSV-Ag1)ELISA 試劑盒 HPV18 E6 人類狀瘤病毒18E6 0.5mg

phospho-HDAC1 (Ser423)： 0酸化組蛋白去乙酰化酶1抗體 GHR Others Mouse 小鼠 GHR / GHBP 人細胞裂解液 (陽性對照)

白細胞介素1受體銜接蛋白抗體LX-2, 人肝星形細胞株 大鼠蛋酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α)ELISA試劑盒 DHEA-S7(Human Dehydroepiandrosterone S7)  人脫氫表雄酮S7 96T

PRRSV M protein： 豬藍耳病病毒M蛋白抗體 IL17RD Others Human 人 IL17RD 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺成纖維細胞;IMR-90 大鼠蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA 試劑盒 DHEA(Human Dehydroepiandrosterone)  人脫氫表雄酮 96

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應注意選擇針對已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因為由于樣品處理過程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對它們產(chǎn)生的抗體可能無法識別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對于單克隆抗體尤其如此。