成骨細(xì)胞特異性因子2重組兔單克隆抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因?yàn)橛捎跇悠诽幚磉^程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對它們產(chǎn)生的抗體可能無法識別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對于單克隆抗體尤其如此。

Periostin is a disulfide linked 90 kDa, 811 amino acid protein originally isolated as a osteoblast-specific factor that functions as a cell adhesion molecule for preosteoblasts and is thought to be involved in osteoblast recruitment,

1、制備抗原。

2、選擇實(shí)驗(yàn)動物。

3、動物免疫。

4、試取血進(jìn)行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實(shí)驗(yàn)動物 兔

4．其它材料及試劑

CM-M047小鼠腸微血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(4)ELISA試劑盒 TNFsR- I (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor I )  小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ 96T

NPY1R： 神經(jīng)肽Y1受體抗體 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK

TE-11(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A-704(人腎癌細(xì)胞) 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA 試劑盒 Casp-3  大鼠胱天蛋白酶3 96T

NMDAR1： 谷酸受體1抗體 人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1

IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒 TNFsR- II (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor II )  小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ 96T

SK-OV-3(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人NK細(xì)胞ELISA試劑盒 TEM 1/CD248(Tumor endothelial marker 1 precursor) 內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗原 0.5mg

IGC： 非洲爪蟾IGC抗體 神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77) 人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA 試劑盒 TFF3 (trefoil factor3) 三葉肽因子3(多肽) 0.5mg

IFITM1： 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體 CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒 TFPI-2 (tissue factor pathway inhibitor-2) 組織因子途徑抑制劑-2抗原 0.5mg

成骨細(xì)胞特異性因子2重組兔單克隆抗體ROCK2： Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體 3T3TK細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3-VP16-TNFa細(xì)胞 人滑膜細(xì)胞RNAHS miRNA5 μg

DLL1 Others Rat 大鼠 DLL1 / Delta-like 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠白介素3(IL3)ELISA試劑盒 Gal-6S(Human galactose-6-sulphate sulphatase)  人半乳糖6酯酶 96T

RRM2： 核糖核苷酸還原酶亞基R2抗體 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO???