泛素結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對(duì)靶蛋白的特異性。選擇針對(duì)不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對(duì)已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級(jí)結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會(huì)表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因?yàn)橛捎跇悠诽幚磉^程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時(shí)，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對(duì)它們產(chǎn)生的抗體可能無法識(shí)別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識(shí)別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對(duì)于單克隆抗體尤其如此。

Ubiquitin (Ub) is among the most phylogenetically conserved proteins known. The primary function of this small, 76 amino acid protein is to clear abnormal, foreign and improperly folded proteins by targeting them for degradation by the 26S proteosome.

1、制備抗原。

2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3、動(dòng)物免疫。

4、試取血進(jìn)行測(cè)試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對(duì)異種動(dòng)物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動(dòng)物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動(dòng)物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔

4．其它材料及試劑

體外非細(xì)胞系統(tǒng)血紅素氧合酶（HEME OXYGENASE）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

免疫印跡AP－BCIP/NBT底物顯色試劑盒

酵母細(xì)胞質(zhì)粒提取試劑盒

TRAIL 蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

通用型幽門螺桿菌Helicobacter pylori基因檢測(cè)試劑盒

載玻片細(xì)胞蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒-LEPTIN

動(dòng)物組織鈉/鉀ATP酶（Na＋/K＋ －ATPase）活性比色法

細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）熒光測(cè)定試劑盒（單線態(tài)氧氣）

冰凍切片總高氯酸萘醌（PAN）染色試劑盒

植物脯羥化酶（prolil hydroxylase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

石蠟切片組織CDK4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

麥芽β-葡聚糖酶比色法定量檢測(cè)試劑盒

非同位素AP－BCIP/NBT法DNA南方雜交試劑盒

細(xì)胞肌酸激酶同工酶腦型（CK--BB）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

真菌/酵母細(xì)胞線粒體DNA萃取試劑盒

著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體

感光覺蛋白ECPN抗體

染色質(zhì)修飾蛋白2B抗體

KIAA1614蛋白抗體

細(xì)胞色素b5還原酶3抗體

β氨基己糖苷酶A抗體

酪蛋白激酶受體B1+B2抗體

泛素結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體A激酶錨定蛋白5抗體