精子卵子結(jié)合生成堿性螺旋蛋白抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類(lèi)型顯著影響抗體對(duì)靶蛋白的特異性。選擇針對(duì)不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無(wú)法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對(duì)已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類(lèi)似三級(jí)結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過(guò)程中添加到肽中，否則它們不會(huì)表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因?yàn)橛捎跇悠诽幚磉^(guò)程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時(shí)，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對(duì)它們產(chǎn)生的抗體可能無(wú)法識(shí)別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識(shí)別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對(duì)于單克隆抗體尤其如此。

SOHLH1 is a 328 amino acid protein that localizes to both the nucleus and the cytoplasm and contains one bHLH domain through which it may function as a transcription factor during oogenesis and spermatogenesis. The gene encoding

1、制備抗原。

2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3、動(dòng)物免疫。

4、試取血進(jìn)行測(cè)試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對(duì)異種動(dòng)物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動(dòng)物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動(dòng)物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔

4．其它材料及試劑

細(xì)胞醛縮酶（ADOLASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

HSV病毒DNA純化試劑盒

P1噬菌體培養(yǎng)試劑盒

載玻片細(xì)胞FSH-BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

通用型豬副豬嗜血桿菌（HPS）基因檢測(cè)試劑盒

通用型二氧化碳（CO2）濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞異戊二烯焦磷酸異構(gòu)酶（isopentenyl pyrophosphate isomerase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化物異構(gòu)前列（ISOPROSTANE）細(xì)胞流式分析試劑盒

全組織磷酸化酶活性染色試劑盒

細(xì)菌革蘭氏（GRAM）染色試劑盒

載玻片細(xì)胞PAR-2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

果菜D-糖酸內(nèi)脂比色法定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞氯乙?；D(zhuǎn)移酶（CAT）報(bào)告基因活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

組織C-TAK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形態(tài)高質(zhì)染色試劑盒

整合素樣金屬與10型抗體

干燥綜合征相關(guān)蛋白2抗體

人S100B蛋白多克隆抗體

Leishmanolysin樣肽酶抗體

細(xì)胞色素P450 2U1抗體

γS-crystallin蛋白抗體

離子型谷受體4抗體

精子卵子結(jié)合生成堿性螺旋蛋白抗體BEND4蛋白抗體