0.2mmol 5-oxoPro-His-NHNH2懸浮于0.9ml二甲基甲酰胺和0.7ml二甲亞砜的混合溶劑中，在0℃和攪拌下，加入0.8mmol 5.7mol/L鹽酸的二氧六環(huán)溶液，劇烈攪拌5min，得到澄清的溶液。冷至-20℃，加入0.22mmol亞硝酸叔丁酯，再攪拌25min。冷至-30℃，加入0.8mmol三乙胺來中和。加人冷至-20℃的0.1mmol的L-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(t-Bu)-Leu-Arg-PrcrNHNHCONH2和0.1mmol三乙胺溶于lml二甲基甲酰胺的溶液，然后在4℃下攪拌24h。減壓蒸出溶劑，剩余物用Sephadex LH-20進行柱層析，用二甲基甲酰胺洗脫。然后用SephadexG-25來提純，用正丁醇：乙酸：水：吡啶=5：1：5：1(體積比)來洗脫，可得產(chǎn)物。