靈敏 ECL 化學(xué)發(fā)光試劑盒
MCE 國際站：Sensitive ECL Kit
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件：4°C，1 年避光保存
簡介：靈敏 ECL 化學(xué)發(fā)光試劑盒可用于檢測辣根過氧化物酶 (HRP) 標(biāo)記的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。
概述：MCE 靈敏 ECL 化學(xué)發(fā)光試劑盒用于檢測辣根過氧化物酶 (HRP) 標(biāo)記的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。HRP 標(biāo)記的抗體直接或間接結(jié)合膜上的目的蛋白，在洗膜后加入本試劑盒配制的 ECL 工作液，即可由 HRP 催化產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，結(jié)果可通過 X 光膠片壓片或 CCD 成像系統(tǒng)進(jìn)行檢測。本產(chǎn)品配方，靈敏度高，對抗原的低檢測限度可達(dá)低皮克級別，1-2 小時內(nèi)檢測信號仍保持穩(wěn)定。本產(chǎn)品配方經(jīng)過優(yōu)化，適用于極低濃度的抗體檢測，在WB 實(shí)驗中，一抗 (1 mg/mL) 儲存液可稀釋 1:1,000-1:4,000 倍 (終濃度約 0.25-1 μg/mL)，二抗 (1 mg/mL) 儲存液可稀釋 1:5,000-1:10,000 倍 (終濃度約0.1-0.2 μg/mL)。持久的發(fā)光信號，高的信噪比，保證了最佳的檢測效果。
描述：
MCE Sensitive ECL Kit 通過在 HRP 和過氧化物存在下氧化魯米諾，實(shí)現(xiàn)低皮克級抗原檢測。該反應(yīng)產(chǎn)生長時間的化學(xué)發(fā)光，可在 X 射線膠片或數(shù)字成像系統(tǒng)上可視化。
該試劑盒產(chǎn)生強(qiáng)而持久的信號（6-8 小時），結(jié)合非常低的背景水平，可實(shí)現(xiàn)長時間曝光并檢測低豐度蛋白質(zhì)。在 Western Blot 實(shí)驗中，一抗（1 mg/mL）的儲存液可以按 1:1,000-1:4,000 的比例稀釋（最終濃度約為 0.25-1 μg/mL）。二抗（1 mg/mL）的儲存液可以按 1:5,000-1:10,000 的比例稀釋（最終濃度約為 0.1-0.2 μg/mL）。
操作說明：1. 進(jìn)行常規(guī) WB 操作：電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉、HRP 標(biāo)記抗體孵育、洗膜。一抗 (0.25-1 μg/mL) 室溫孵育 1 h 或 4°C 過夜，洗膜后，二抗 (0.1-0.2 μg/mL) 室溫孵育30-60 min。2. 配制 ECL 工作液：在使用前等量混合適量 A 液和 B 液，混合后盡快使用。3. Western 二抗孵育后，進(jìn)行數(shù)次洗滌，用平頭鑷子將印跡膜取出，瀝干膜上的洗膜液，將結(jié)合有蛋白的一面朝上，放置于潔凈保鮮膜上。4. 根據(jù)印跡膜的大小，按 0.125 mL 工作液/cm2 膜的比例滴加 ECL 工作液到膜上，確保工作液均勻覆蓋在整張膜上，室溫孵育 3-5 min。5. 棄去印跡膜上的 ECL 工作液，用吸水紙吸去過多的液體。將印跡膜放在兩片保鮮膜中間，隨后進(jìn)行壓片檢測或成像儀檢測。6. 壓片檢測：將印跡膜固定于片夾內(nèi)。暗室內(nèi)壓片 1 min，立即顯影定影，根據(jù)結(jié)果再調(diào)整壓片時間?；蛑苯訅浩?0.5、1、3、5 min，然后一起顯影定影觀察結(jié)果。7. 成像儀檢測：將印跡膜放置到成像儀內(nèi)，參考儀器說明書進(jìn)行檢測。
注意事項：1. 為獲得最佳實(shí)驗結(jié)果，請務(wù)必優(yōu)化實(shí)驗條件，包括：樣品量、凝膠類型、轉(zhuǎn)膜方法、膜類型、封閉試劑、洗滌緩沖液、一抗和二抗?jié)舛纫约胺跤龝r間等。2. 實(shí)驗過程中請確保膜不會變干。3. 為獲得最佳實(shí)驗結(jié)果，請在孵育步驟中使用搖床。4. A 液和 B 液在吸取過程中必須更換槍頭，A 液和 B 液相互污染后會導(dǎo)致 A 液或 B 液逐漸失效，影響后續(xù)的使用效果。5. 實(shí)驗室常見照明不會損害 ECL 工作液，但曝露于日光或強(qiáng)光下時間過久會降低試劑靈敏度，移至暗室操作即可。6. 疊氮鈉 (NaN3) 會抑制 HRP 活性，應(yīng)避免在緩沖液中使用 NaN3，如必須使用，勿超過 0.01%。7. 接觸膜時請佩戴手套且使用干凈鑷子等潔凈器材，避免蛋白污染及高背景。8. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。9. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
熱銷產(chǎn)品：Acifran | D-Serine | Baricitinib (phosphate) | Butylated hydroxytoluene | Rebamipide | Panitumumab (anti-EGFR) | Gypenoside XLVI | Trifarotene | CJJ300 | Tolbutamide
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