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MCE 國際站：VF 594 Click-iT EdU Universal Cell Proliferation Detection Kit

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件： -20℃， 三年。避光保存，避免反復(fù)凍融。

簡介：MCE VF 594 Click-iT EdU 通用款細(xì)胞增殖檢測試劑盒含有 EdU 及 VF 594 Azide 染料試劑，另配套含有點(diǎn)擊化學(xué)所需的催化劑、緩沖液，從而實(shí)現(xiàn)簡單、快速、高效、靈敏地細(xì)胞增殖檢測。

概述：細(xì)胞增殖能力的檢測對(duì)評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗腫瘤藥物效果等至關(guān)重要。準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖檢測方法為直接檢測細(xì)胞中新 DNA 的合成，傳統(tǒng)的 BrdU （5-Bromo-2'-deoxyuridine） 法步驟繁多，且需要使用 BrdU 抗體，影響因素較多，穩(wěn)定性較差。 EdU （5-Ethynyl-2'-deoxyuridine） 法是一種在 BrdU 法基礎(chǔ)上升級(jí)換代的新方法，只需多聚甲醛固定和 Triton X-100 促滲就可以使檢測試劑進(jìn)入細(xì)胞，少量的疊氮化染料通過點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng) （Click Chemistry） 即可快速有效地標(biāo)記出整合的 EdU。MCE VF 594 Click-iT EdU 通用款細(xì)胞增殖檢測試劑盒含有 EdU 及 VF 594 Azide 染料試劑，另配套含有點(diǎn)擊化學(xué)所需的催化劑、緩沖液，從而實(shí)現(xiàn)簡單、快速、高效、靈敏地細(xì)胞增殖檢測。除檢測細(xì)胞增殖外，試劑盒中額外提供的 Hoechst 33342，可用于細(xì)胞周期分析。本試劑盒適用于熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀等檢測，對(duì)于 96 孔板檢測可檢測 100 孔樣。

描述：

MCE VF 594 Click-iT EdU 通用細(xì)胞增殖檢測試劑盒包含 EdU 和 VF 594 疊氮化物染料，以及點(diǎn)擊化學(xué)所需的催化劑和緩沖液。它可用于簡單、快速、高效和靈敏的細(xì)胞增殖檢測。試劑盒中還提供 Hoechst 33342 用于細(xì)胞周期分析。該試劑盒適用于熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)檢測。100T 是指檢測 96 孔板的 100 個(gè)樣本。

操作說明：1. 細(xì)胞培養(yǎng)取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞，以每孔 4 × 103 ~ 1 × 105 細(xì)胞（可根據(jù)細(xì)胞大小、生長速度以及實(shí)驗(yàn)處理的具體要求調(diào)整細(xì)胞數(shù)量和密度）接種于 96 孔板中，培養(yǎng)至正常生長階段。2. 藥物處理 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行各種藥物處理或者其他刺激處理等。3. EdU 標(biāo)記1) 用細(xì)胞培養(yǎng)基按一定比例稀釋 EdU 溶液至合適濃度后加入細(xì)胞中，混勻；設(shè)置不加 EdU 處理的陰性對(duì)照組。注：對(duì)于 A594、 HeLa 和 NIH/3T3 等貼壁細(xì)胞，推薦 EdU 的終濃度為 10 µM。但細(xì)胞類型、培養(yǎng)液種類、細(xì)胞密度、細(xì)胞增殖速度等多方面因素會(huì)影響 EdU 摻入到細(xì)胞中的量，因此初次使用時(shí)建議設(shè)置 EdU 濃度梯度。如果之前使用過 BrdU 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，則可以參考 BrdU 濃度作為 EdU 的濃度。2) 細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育 2 h，去除培養(yǎng)基。 

注意事項(xiàng)：1. 使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2. 熒光染料均存在淬滅問題，實(shí)驗(yàn)操作時(shí)請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。3. Click-iT Additive 配制成溶液后請(qǐng)注意適當(dāng)分裝， -20℃ 保存。如溶解后有白色物質(zhì)析出，請(qǐng)上下顛倒數(shù)次，待其溶解后使用。 4. 本品會(huì)影響 GFP、 RFP、 mCherry 等熒光蛋白的熒光，對(duì)于熒光蛋白如 GFP、 TC-FLAsH 和 TC-ReAsH 類試劑，需要在 Click 反應(yīng)前進(jìn)行反應(yīng)和檢測。由于 Phalloidin 不兼容 Click 反應(yīng)，推薦使用 Tubulin-Tracker Red （ HY-131010 ） 進(jìn)行細(xì)胞微管的檢測。5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。6. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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