一、全視野細(xì)胞掃描分析儀的原理介紹：
（1）Celigo Image Cytometer是一款新科技的細(xì)胞全孔高速掃描成像分析儀。

（2）Celigo 細(xì)胞成像分析儀可分析生長(zhǎng)在微孔板和 T‐flask 中的貼壁和非貼壁（懸?。┘?xì)胞，具有超越傳統(tǒng)方法的更好的優(yōu)勢(shì)。

（3）具有一致的，高質(zhì)量，全孔的明亮視野（brightfield）成像功能，結(jié)合強(qiáng)大的分割軟件可在 5 分鐘內(nèi)獲得整個(gè)微孔板的所有孔中的所有細(xì)胞的高質(zhì)量數(shù)據(jù)。Celigo 具有非破壞性和非侵入性明亮視野分析功能，并有多色熒光功能作補(bǔ)充，使系統(tǒng)適合任何基于細(xì)胞的廣泛的實(shí)驗(yàn)。

（4）其分辨率足夠高，達(dá)到1um成像精度，相當(dāng)于顯微鏡15X放大倍數(shù)，對(duì)于處理單個(gè)細(xì)胞的信號(hào)識(shí)別是足夠清晰完整的。

二、全視野細(xì)胞掃描分析儀的斑馬魚(yú)（北京）科技有限公司，是PerkinElme珀金埃爾默的經(jīng)銷商，負(fù)責(zé)產(chǎn)品的推廣銷售和技術(shù)支持，為您提供儀器的參數(shù)、價(jià)格、選型、技術(shù)原理等信息，更多信息可咨詢。

Celigo的典型圖像如下：

三、其次，在這種成像精度下，如何實(shí)現(xiàn)對(duì)1536孔，384孔，96孔，24孔，甚至6孔板的全孔成像呢？這涉及到其采用的一個(gè)光學(xué)技術(shù)，應(yīng)用一個(gè)大型的F-theta透鏡和電磁檢流計(jì)鏡片來(lái)對(duì)全孔進(jìn)行大面積快速掃描。其技術(shù)原理圖如右。在該技術(shù)下，透鏡的位移*由電磁推動(dòng)，安靜快速而*沒(méi)有機(jī)械位移，其精度可小于1um，從而保證了后續(xù)的多圖像拼接保持了一致性。

這就帶來(lái)了細(xì)胞大規(guī)模圖像分析的幾個(gè)好處：

☆ 原位in situ
在細(xì)胞生長(zhǎng)的過(guò)程中無(wú)需消化細(xì)胞，無(wú)需取樣，無(wú)需進(jìn)行任何處理，可在任何時(shí)間點(diǎn)隨時(shí)成像，隨時(shí)分析，隨時(shí)獲得統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理結(jié)果。

☆ 全孔 full well
如6孔板一個(gè)孔的完整細(xì)胞圖像，由256張細(xì)胞圖像拼接而成；96孔板一個(gè)孔的完整細(xì)胞圖像，由16張細(xì)胞圖像拼接而成。由于每個(gè)孔均是高清晰度的全孔細(xì)胞分析，從而保證了統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的一致性。（孔與孔之間由于細(xì)胞加樣量的差異，細(xì)胞生長(zhǎng)的差異，懸浮沉降細(xì)胞移動(dòng)導(dǎo)致的固定小視野不能準(zhǔn)確追蹤等問(wèn)題均得到解決。）

☆ 全孔照明亮度的均一。這是由于掃描光路的特性帶來(lái)的。圖像見(jiàn)下：

☆ 快速。這是系統(tǒng)的掃描光路電磁透鏡技術(shù)帶來(lái)的。其處理全孔高精度圖像分析下的處理速度如下：

☆ 整板whole plate
整板的全孔圖像預(yù)覽和曲線分析帶來(lái)一目了然的細(xì)胞分析結(jié)果，而這一切均在<10min的速度下完成，從而簡(jiǎn)單實(shí)現(xiàn)多時(shí)間點(diǎn)的整板細(xì)胞生長(zhǎng)分析快速追蹤。
適用于各種規(guī)格細(xì)胞培養(yǎng)板（6/12/24/96/384/1536孔板）和培養(yǎng)瓶(T-25&T-75)。

☆ 多通道m(xù)ulti channels
共有四個(gè)通道，采用四個(gè)獨(dú)立的LED光源，包括一個(gè)高質(zhì)量的明場(chǎng)通道，和三個(gè)熒光通道。標(biāo)配：
- 藍(lán)色熒光：ex/em377/477(e.g., Hoechst, DAPI)
- 綠色熒光：ex/em483/536(e.g., FITC, Calcein, Alexa Fluor 488, GFP)
- 紅色熒光：ex/em531/629 (e.g., PI, Texas Red, Alexa Fluor 568)
選配：可替換以上三個(gè)熒光的任一通道
- Far-Red (e.g. Alexa Fluor 647, DRAQ5)

Celigo能做什么？
Celigo是一款基于多熒光通道細(xì)胞成像的快速全孔&整板掃描分析儀，因此基于細(xì)胞成像的關(guān)于全孔的細(xì)胞生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)和全孔的細(xì)胞熒光功能檢測(cè)的應(yīng)用，都可以選擇Celigo。

☆ 基于高質(zhì)量明場(chǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)分析 Label-free assays

靈活的分析軟件設(shè)計(jì)可以通過(guò)兩種分析方法獲取細(xì)胞增殖曲線。

☆ 基于熒光通道的細(xì)胞功能分析Fluorescence assays

應(yīng)用舉例：

細(xì)胞活性（毒性）分析 Cell Viability(Toxicity)
通過(guò)Calcein AM/PI/Hoechst33342三種熒光染料分別標(biāo)記活/死/全部細(xì)胞。通過(guò)Celigo可輕松獲取全孔&整板細(xì)胞圖像和自動(dòng)報(bào)告活死細(xì)胞百分比，以及不同組別的對(duì)照數(shù)據(jù)。

細(xì)胞增殖(DNA合成)Cell Proliferation(DNA Synthesis)
細(xì)胞圖像數(shù)據(jù)
A．96孔板全孔A549細(xì)胞圖像（BrdU-綠色，DAPI-藍(lán)色）；B．局部放大全孔細(xì)胞圖像（DAPI-所有細(xì)胞，BrdU-S期細(xì)胞）

設(shè)門數(shù)據(jù)

克隆形成Colony Formation

細(xì)胞遷移（損傷修復(fù)）Cell Migration(Wound Healing)
使用Oris Platypus專用損傷修復(fù)板，通過(guò)Celigo自動(dòng)分析明場(chǎng)&熒光通道細(xì)胞數(shù)量或細(xì)胞融合度，獲得損傷修復(fù)/遷移的細(xì)胞增殖情況。

熒光蛋白表達(dá)Fluorescence Proteins
96孔板中掃描全孔Hela細(xì)胞轉(zhuǎn)染后GFP/RFP表達(dá)的情況。

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同濃度的編碼turbo-GFP的質(zhì)粒到Hela細(xì)胞，轉(zhuǎn)染后多個(gè)時(shí)間點(diǎn)分析96孔板中GFP陽(yáng)性表達(dá)率，GFP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，以及死細(xì)胞（PI標(biāo)記）的百分比。

3D腫瘤球分析3D Tumor Speroid

17-AAG和PI-103濃度依賴性的腫瘤球生長(zhǎng)抑制。

（a) 細(xì)胞接種、加藥、Celigo成像和分析流程圖；(b-g) 不同藥物濃度對(duì)腫瘤球生長(zhǎng)的抑制情況。

細(xì)胞重編程iPSC Reprogramming

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞通過(guò)Yamanaka方法誘導(dǎo)生成iPSC，通過(guò)Celigo掃描6孔板檢測(cè)和分析iPSC克隆形成情況。
Data courtesy of Kaji Lab, MRC Centre for Regenerative Medicine, University of Edinburgh

干細(xì)胞多能性鑒定Stem Cell Pluripotency

誘導(dǎo)后的多能干細(xì)胞通過(guò)Celigo檢測(cè)特異性多能干細(xì)胞的標(biāo)記（OCT4，SSEA4）。