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檢測原理:試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被(Caffeine)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的競爭抗原,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(Caffeine)呈負相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
實驗前的準備:
1) 確定人(Caffeine)檢測試劑盒免費代測 競爭ELISA在有效期內
2) 仔細閱讀說明書,按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
3) 提前準備好所有實驗額外所需的設備(如離心機、37℃恒溫箱、高精度加樣器及槍頭、酶標儀等)
4) 標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內無法實驗者注意低溫保存。根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量
5) 按說明書將所有試劑平衡至室溫,配制所需試劑。嚴格按照說明書進行實驗步驟。
注意:我司ELISA試劑盒中每個試劑都有穩(wěn)定體系的作用,請嚴格按照說明書操作
人(Caffeine)檢測試劑盒免費代測 競爭ELISA組成及其配置:(檢測范圍請參考說明書)
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
競爭抗原-HRP | 6mL | 3mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
樣品收集、處理以及保存方法:
1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行。
3. 植物萃取液或其它相關樣本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測?;ㄉ鷺颖咎幚矸椒ǎ簶颖救し鬯椋Q取5g于100ml具塞三角瓶中,加入25ml 60%甲醇誰溶液和20ml正乙烷振蕩10min,濾紙過濾,棄去1/4初濾液,收集其余濾液于125ml分液漏斗中,靜置分層后放出下層60%甲醇水提溶液?,F(xiàn)提取液2ml,加入2ml超純水稀釋,使提取液甲醇濃度為30%,此為樣品代測液。
4. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
上海軒澤康生物ELISA檢測試劑盒特點:
【適用范圍廣】:ELISA方法可用于多種生物樣本,如血清、血漿、尿液、細胞培養(yǎng)上清等,適用于各種疾病的檢測。
【操作簡便】:ELISA實驗操作相對簡單,不需要復雜的設備和技術,便于在實驗室中廣泛應用。
【結果可靠】:ELISA方法具有較強的穩(wěn)定性和可重復性,使得檢測結果具有較高的可靠性。
【高靈敏度】:ELISA方法具有很高的靈敏度,可檢測到微克甚至納克級別的抗原。這使得ELISA在病原體感染、腫瘤標志物等疾病的早期診斷中具有重要價值。
【高特異性】:ELISA方法利用抗原與抗體的特異性結合,避免了非特異性吸附的影響,使得檢測結果具有較高的特異性。
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