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一. 樣品收集、處理及保存方法:人(ALT)酶活性檢測試劑盒 ELISA夾心法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
二. 自備物品:
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
三. 人(ALT)酶活性檢測試劑盒 ELISA夾心法實驗注意事項:
1) 充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果很重要,在加液后請輕輕晃動整個96板孔,以保證混勻。
2) TMB溶液請勿接觸氧化劑或金屬,否則容易失效。
3) 加樣時請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。加樣過程中必須避免氣泡的產(chǎn)生。
4) 檢測標準品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
5) 洗滌過程非常重要,洗滌不充分會下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
四. 檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被(ALT)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(ALT)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
上海軒澤康生物有限公司的ELISA檢測試劑盒品質(zhì)高、曲線漂亮,并提供免費代測服務(wù),各種種屬、各種系列elisa科研實驗檢測試劑盒,詳情可咨詢我司銷售人員或咨詢我司在線客服。ELISA檢測試劑盒代測服務(wù)內(nèi)容說明書:
1) 服務(wù)項目:間接法ELISA檢測
內(nèi)容說明:客戶提供檢測材料
結(jié)果周期:檢測試驗報告 1周
2) 服務(wù)項目:夾心法ELISA檢測
內(nèi)容說明:客戶提供檢測材料
結(jié)果周期:檢測試驗報告 1周
3) 服務(wù)項目:競爭法ELISA檢測
內(nèi)容說明:客戶提供檢測材料
結(jié)果周期:檢測試驗報告 1周
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