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產(chǎn)品詳情:
【產(chǎn)品名稱】:人(Thrombin)酶活性檢測試劑盒 ELISA法
【產(chǎn)品貨號】:XZK-3339
【種屬齊全】:大小鼠、豚鼠、豬、犬、兔、貓、魚、雞、鴨等
【檢測方法】:夾心法
【供貨能力】:現(xiàn)貨供應(yīng)(具體需要聯(lián)系相關(guān)客服),可根據(jù)客戶需求批量定制生產(chǎn)
【特色服務(wù)】:免費(fèi)代測,實(shí)驗(yàn)全程技術(shù)指導(dǎo)
【產(chǎn)品價(jià)格】:(含稅含運(yùn)費(fèi),我們?nèi)烫峁〦LISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測)
【銷售優(yōu)勢】:價(jià)格行業(yè)優(yōu)勢、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被(Thrombin)的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(Thrombin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品活性。
人(Thrombin)酶活性檢測試劑盒 ELISA法 操作步驟:
【標(biāo)準(zhǔn)品的加樣】:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。
【加樣】:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
【加酶】:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
【溫育】:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
【配液】:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
【顯色】:每孔先加入底物溶液A 50μl,再加入底物溶液B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
【終止】:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
【測定】:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
5、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時(shí)間。
6、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個(gè)就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。
7、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。
8、底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。
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