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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> 人蓖麻毒素(RT)ELISA檢測(cè)試劑盒 定性測(cè)定
一. 實(shí)驗(yàn)原理:試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人蓖麻毒素抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人蓖麻毒素(RT)的存在與否。
二. 人蓖麻毒素(RT)ELISA檢測(cè)試劑盒 定性測(cè)定組成及其配置:
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無(wú) |
陰性對(duì)照 | 0.5mL | 0.5mL | 無(wú) |
陽(yáng)性對(duì)照 | 0.5mL | 0.5mL | 無(wú) |
檢測(cè)抗原-HRP | 10mL | 5mL | 無(wú) |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋 |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
底物A | 6mL | 3mL | 無(wú) |
底物B | 6mL | 3mL | 無(wú) |
終止液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無(wú) |
說(shuō)明書 | 1份 | 1份 | 無(wú) |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無(wú) |
三. 常見問(wèn)題解答:
1. 【高背景或陰性對(duì)照值偏高】
可能的原因:陰性對(duì)照孔被陽(yáng)性對(duì)照或樣品污染;抗體非特異性結(jié)合;酶結(jié)合物過(guò)濃;孵育溫度過(guò)高;底物在使用前曝光;讀板前停留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)
上海軒澤康生物為您提供解決方案:洗滌時(shí)勿將洗液溢出孔外;建議更換封閉液;檢查酶結(jié)合物是否按照說(shuō)明書規(guī)定稀釋;檢查孵育箱的溫度是否正確、穩(wěn)定;應(yīng)保存在暗處、避光;加終止液后3分鐘內(nèi)讀數(shù)。
2. 【陽(yáng)性對(duì)照值偏低或低吸光度】
可能的原因: 試劑未平衡至室溫;檢測(cè)體積偏小;孵育時(shí)間過(guò)短;底物受污染;樣本中有抑制劑。
上海軒澤康生物為您提供解決方案:實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑盒從冰箱內(nèi)取出平衡至室溫(20-25℃);檢查移液器吸液通道是否堵塞;使用計(jì)時(shí)器,準(zhǔn)確孵育時(shí)間;使用新配置的試劑,重新實(shí)驗(yàn);疊氮鈉會(huì)抑制HRP酶的活性。
四. 人蓖麻毒素(RT)ELISA檢測(cè)試劑盒 定性測(cè)定操作注意事項(xiàng)
1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 預(yù)處理后的樣本請(qǐng)按照操作步驟用稀釋液適當(dāng)稀釋以達(dá)到試劑盒的的最佳檢測(cè)效果。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
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