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上海軒澤康生物有限公司為您提供科研elisa試劑盒,種屬標本齊全,有zhuan門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、山羊、牛、豬、犬、雞、馬、猴、魚)、植物土壤以及藥殘類酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒。
小鼠S100鈣結合蛋白A9(S100A9)ELISA試劑盒樣品收集、處理方法:
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
關于血清樣本注意事項:
大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規(guī)方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP未標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異顯色。此外還應避免細菌污染,因為菌體中可能含有內源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應。血清標本宜在新鮮時檢測。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
血清的采集、處理以及保存如下:
① 真空采集新鮮血液,加入無菌試管中;
② 采血后室溫靜置1小時;
③ 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10分鐘
④ 取上清,分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時內檢測存于2-8℃;1個月內檢測存于-20℃;長期檢測可存于-80℃,可放置保存6個月)
樣本應避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
注意:我司ELISA試劑盒中每個試劑都有穩(wěn)定體系的作用,請嚴格按照說明書操作
小鼠S100鈣結合蛋白A9(S100A9)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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