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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> 植物可溶性多糖(SSP)ELISA檢測(cè)試劑盒
上海軒澤康生物有限公司擁有各式各樣的ELISA檢測(cè)試劑盒共市場(chǎng)選擇如:人ELISA試劑盒、豚鼠ELISA試劑盒、兔ELISA試劑盒、豬ELISA試劑盒、小鼠ELISA試劑盒、植物ELISA試劑盒、昆蟲ELISA試劑盒、大鼠ELISA試劑盒等等,總有一款適合使用需求。
檢測(cè)原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被可溶性多糖(SSP)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的可溶性多糖(SSP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法:
1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。
3. 植物萃取液或其它相關(guān)樣本:請(qǐng)1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè)。
4. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
植物可溶性多糖(SSP)ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng):
1. 使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0、100、200、400、800、1600 mg/mL
植物可溶性多糖(SSP)ELISA檢測(cè)試劑盒使用指南:
步驟一:從冷藏環(huán)境中取出試劑盒,室溫放置30分鐘以確保所有試劑穩(wěn)定。
步驟二:根據(jù)待測(cè)樣本數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條密封放回冰箱。
步驟三:分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、空白孔、待測(cè)樣品孔(為避免實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔)。
步驟四:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白孔中,空白對(duì)照孔加入50ul的蒸餾水。齊譽(yù)孔加入50ul的待測(cè)樣本。
步驟五:標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔各孔加入100ul的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
步驟六:酶標(biāo)板用封板膜密封后放入濕盒于37℃恒溫孵育1小時(shí)。
步驟七:洗板。用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15~30秒,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙拍干
步驟八:各孔分別加入底物A、底物B 50ul(不用吹打)
步驟九:37℃避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液
步驟十:在450nm波長(zhǎng)讀取各孔的OD值
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