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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> 植物茉莉酸(JA)ELISA試劑盒 酶標(biāo)儀檢測(cè)
檢測(cè)原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被茉莉酸(JA)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的茉莉酸(JA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法:
1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。
3. 植物萃取液或其它相關(guān)樣本:請(qǐng)1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè)。
4. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
植物茉莉酸(JA)ELISA試劑盒 酶標(biāo)儀檢測(cè)組成及其配置:(標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:0、250、500、1000、2000、4000 pg/mL)
名稱(Name) | 96孔配置 | 48孔配置 | 保存條件 |
微孔酶標(biāo)板(Microelisa stripplate) | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 2-8℃ |
標(biāo)準(zhǔn)品(Standard) | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 2-8℃ |
稀釋液(Sample Diluent) | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
檢測(cè)抗體-HRP(HRP-Conjugate reagent) | 10mL | 5mL | 2-8℃ |
20×洗滌緩沖液(20X Wash solution) | 25mL | 15mL | 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋 |
底物A(Chromogen Solution A) | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
底物B(Chromogen Solution B) | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
終止液(Stop Solution) | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
封板膜(Closure plate membrane) | 2張 | 2張 | 2-8℃ |
說(shuō)明書(shū)(User manual) | 1份 | 1份 | 2-8℃ |
自封袋(Sealed bags) | 1個(gè) | 1個(gè) | 2-8℃ |
加樣注意事項(xiàng):
1. 加樣前:溶液應(yīng)充分混勻。加樣時(shí)避免90度向孔中滴加液體,否則會(huì)導(dǎo)致液體殘留再吸頭上,從而導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確。正確的加樣方法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。
2. 加樣時(shí):避免速度過(guò)快,否則無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性;避免液體濺出;
3. 加樣品時(shí):?jiǎn)慰子昧恳螅骸?0微升/指標(biāo),如需要做2個(gè)復(fù)孔則血量≥100微升/指標(biāo)。
4. 每次加樣順序一致,尤其底物、終止液順序一致,保證每個(gè)孔顯色時(shí)間相同。
5. 如果移液槍漏氣以至于加樣的量不夠,不能用槍吸出再加,做相應(yīng)記錄實(shí)驗(yàn)。
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