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TNF-β是炎癥和免疫反應(yīng)中一種重要的介質(zhì)。它屬于TNF超家族配體并通過TNFR1和TNFR2兩種受體傳遞信號。TNF-β

由活化T細胞和B細胞產(chǎn)品，并和TNF-α有相似的活性。像TNF-α一樣，TNF-β

參與多種生物過程條件，包括細胞增殖、分化、凋亡、脂質(zhì)代謝、凝固和神經(jīng)傳遞。TNF-β

以可溶性多肽形式分泌，但可以與β淋巴毒素形成異三聚體，其可以有效將TNF-β錨在細胞表面。TNF-β

對大范圍腫瘤細胞具有細胞毒性。人和小鼠之間有顯著的交叉反應(yīng)性。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被腫瘤壞死因子β（TNF-β）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子β（TNF-β）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

大鼠腫瘤壞死因子β（TNF-β）ELISA試劑盒組成

注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、15、30、60、120、240 pg/mL

洗板方法：

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2.  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

大鼠腫瘤壞死因子β（TNF-β）ELISA試劑盒操作時注意事項：

1） 收到試劑盒后，為保證檢測效果，需要根據(jù)說明書中保存條件正確儲存。除非特別注明，試劑盒大多再2~8℃條件下儲存。

2） 在實驗進行前，請確認包裝中的試劑盒成分與說明書一致，再進行后續(xù)操作。

3） 溶解標準品過程中，注意標準品是否受潮，過程中要避免產(chǎn)生泡沫。

4） 為了避免交叉污染，配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需呀更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

5） 每次孵育時，正確使用封板膠條紙可保證結(jié)果的準確性。

6） 正確洗板有助于實驗結(jié)果的穩(wěn)定性。

7） TMB顯色底物在上板前應(yīng)為無色，請避光保存。加入孔板后，將由無色變成不同程度的藍色。

8） 終止液上板順序需與底物上板順序一致，加入終止液，溶液顏色由藍色變?yōu)辄S色。如果出現(xiàn)綠色，即表明終止液與底物未混勻，請充分混勻。