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上海軒澤康生物有限公司為您提供科研elisa試劑盒,種屬標本齊全,有zhuan門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、山羊、牛、豬、犬、雞、馬、猴、魚)、植物土壤以及藥殘類酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒。
小鼠低氧促有絲分裂因子(HIMF)ELISA試劑盒樣品收集、處理方法:
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
關于血清樣本注意事項:
大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規(guī)方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP未標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異顯色。此外還應避免細菌污染,因為菌體中可能含有內源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應。血清標本宜在新鮮時檢測。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
血清的采集、處理以及保存如下:
① 真空采集新鮮血液,加入無菌試管中;
② 采血后室溫靜置1小時;
③ 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10分鐘
④ 取上清,分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時內檢測存于2-8℃;1個月內檢測存于-20℃;長期檢測可存于-80℃,可放置保存6個月)
樣本應避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被低氧促有絲分裂因子(HIMF)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的低氧促有絲分裂因子(HIMF)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
小鼠低氧促有絲分裂因子(HIMF)ELISA試劑盒組成及其配置:
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、20、40、80、160、320 pg/mL
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