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上海軒澤康生物有限公司為您提供科研elisa試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有zhuan門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、山羊、牛、豬、犬、雞、馬、猴、魚)、植物土壤以及藥殘類酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒。
樣品收集、處理方法:
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
關(guān)于血清樣本注意事項(xiàng):小鼠(RANTES/CCL5)ELISA檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP未標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異顯色。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染,因?yàn)榫w中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
血清的采集、處理以及保存如下:
① 真空采集新鮮血液,加入無菌試管中;
② 采血后室溫靜置1小時(shí);
③ 將采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心10分鐘
④ 取上清,分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時(shí)內(nèi)檢測(cè)存于2-8℃;1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)存于-20℃;長(zhǎng)期檢測(cè)可存于-80℃,可放置保存6個(gè)月)
樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
檢測(cè)原理:小鼠Elisa試劑盒的檢測(cè)原理主要是根據(jù)抗原或者抗體的固定化以及抗原或者抗體酶標(biāo)記作用,再加入酶底物后,使其發(fā)生顯著的顏色反應(yīng)。再根據(jù)顏色反應(yīng)來對(duì)有效成分進(jìn)行定量定性分析。針對(duì)于結(jié)合物的保存,酶和抗體都是活性物質(zhì),容易完成失活現(xiàn)象,應(yīng)該變成高濃度并在冰箱中保存一年方可更穩(wěn)定一些。
小鼠(RANTES/CCL5)ELISA檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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